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调节性T细胞在小鼠抗肾小球基底膜型肾小球肾炎模型中的免疫调节机制研究

周焕;张新;何泳;彭清平;王晓慧

  目的探讨在小鼠抗肾小球基底膜型肾小球肾炎(抗GBM肾炎)模型的肾炎进展中调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)免疫调节机制,为早期干预免疫反应,减轻病理损害提供理论依据。方法将C57BL/6小鼠随机分为2组即正常对照组和抗GBM肾炎模型组。在建模不同时间点即建模的第7、14、21、28天将小鼠处死后收集并检测血清中的肌酐(serum creatinine,SCr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)及尿蛋白含量,随机尿中尿蛋白/肌酐比值(albumin-to-creatinine ratio,ACR)变化;留取肾脏标本检测病理改变。流式细胞术(fluorescence-activated cell sorting,FACS)检测脾脏中Treg细胞表达情况;免疫印迹法(Western blot)检测肾脏组织中DNA结合抑制因子3(Id3)和Foxp3等蛋白表达情况。结果与正常对照组小鼠相比,抗GBM肾炎模型组小鼠肾脏病理示GBM不规则弥漫增厚甚至部分断裂、系膜细胞和基质增生、新月体形成;免疫荧光示鼠IgG和兔IgG在基底膜呈线性沉积;SCr、BUN、尿蛋白和ACR增加明显(P<0.05);抗GBM肾炎模型组中细胞和蛋白水平检测到的相关因子均呈规律性表达:与正常对照组相比,随着病情进展抗GBM肾炎模型组中Th17细胞的表达比例呈现先上升后下降的趋势,而与此同时Treg细胞则从第7天开始即出现升高的趋势,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);抗GBM肾炎模型组小鼠肾脏组织中Foxp3及Id3的蛋白表达均较正常对照组明显增加,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);Id3的蛋白表达与Treg细胞特异性转录因子水平相关。结论在抗GBM肾炎的免疫进程中,Treg发挥重要作用,这种作用可能与转录调节因子Id3有关。……