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t-PA突变体乳腺表达载体的构建及其在乳腺中的瞬时表达

王冬梅;邓继先;程萱;黄秀梨

  目的 :探索建立乳腺瞬时性表达系统 ,用于快速检测所构建的乳腺表达载体的有效性 ,为进行转基因动物实验奠定基础。方法 :DNA常规操作 ;孕小鼠乳腺注射 ;纤维蛋白琼脂糖平板法检测Mut PA。结果 :构建了含有Mut PA基因的乳腺表达载体pB3mt PA ,将此载体直接注射到孕小鼠乳腺中进行暂时性表达 ,产仔后第 4天采乳汁 ,用纤维蛋白琼脂糖平板法检测t PA的活性 ,表达活性可达 2 0~ 4 0U/ml,其活性能被天然的t PA多克隆抗体所中和 ,表达持续期 8d。结论 :所克隆的牛BLG基因70 5bp的 5′端调控序列包含了必需的调控元件 ,并具有调控外源基因的表达的功能 ,克隆的 3′端序列是适合的。构建的表达载体可用于制备转基因动物。……   
[关键词]:β乳球蛋白;突变型组织型纤溶酶原激活剂;暂时性表达系统;乳腺
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《军事医学科学院院刊2000年03期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)