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大白菜几丁质酶CHB4基因的表达研究

甘德芳;朱苏文;范军;程备久

  根据本研究组已克隆的大白菜ClassⅣ类几丁质酶基因序列设计引物,通过RT-PCR反应扩增得到该几丁质酶成熟肽基因CHB4,构建原核表达载体pET-CHB4,利用IPTG诱导表达并对诱导表达参数进行优化,SDS-PAGE分析表明,该基因表达的蛋白分子量为28 kD左右,其表达产物主要以包涵体的形式存在,25℃并没有改变表达蛋白的可溶性,而在pH9.5的培养基条件下,诱导表达产物的上清液中却有重组蛋白条带出现。以酵母菌为指示菌做抑菌圈实验,结果显示IPTG浓度为0.6 mmol/L时抑菌效果最明显。几丁质酶的活力测定结果表明,当IPTG浓度为0.6 mmol/L时,几丁质酶活力达到最大值2.8 U/mL。……   
[关键词]:大白菜;几丁质酶基因;原核表达;包涵体;抑菌试验;酶活测定
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《激光生物学报2007年02期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)