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甘油醛-3-磷酸脱氢酶活性部位巯基与配体结合的关系

赵康源;练永宁;何燕生;邹承鲁

  本文用荧光滴定、透析平衡和分子筛柱层析等方法对甘油醛-3-磷酸脱氢酶(以下简称为GAPDH)与配体的结合进行了研究. 荧光滴定的实验结果,GAPDH酶肮与εNAD~+结合为负协同性,如果酶的Cys-149巯基经碘代乙酸或四硫硫酸钠修饰后,则不仅酶与εNAD~+结合减弱,并且其结合的负协同性也明显减弱.与此相应,εNAD~+与酶蛋白结合后εA部分的荧光增强也不如未修饰酶那样明显.分子筛柱层析的结果指出,当酶的Cys-149巯基经化学修饰后,酶与ATP的结合能力也大大下降.这些结果都说明,酶活性部位Cys-149巯基不仅和酶与NAD~+的菸酰胺部分的结合有关,它的修饰还直接影响到酶的腺嘌呤结合部位,从而影响到酶与配体结合的协同性质.荧光滴定和透析平衡的结果还表明,温度升高酶与εNAD~+结合的负协同性增强,酶与ATP的结合则由非协同性变为负协同性.……   
[关键词]:ATP;GAPDH;NAD;酶浓度;酶蛋白;活性部位;配体结合;甘油醛
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《中国科学1980年12期