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冬虫夏草ISSR-PCR反应体系的建立与优化

谢放;朱子雄;田伟;张楠

  为进一步研究冬虫夏草的遗传多样性,试验采用改良的CTAB法提取高质量DNA模板,克服了冬虫夏草中富含多糖、蛋白、盐类和色素的影响。建立并优化了冬虫夏草ISSR-PCR最适反应体系,即在25μL体系中反应物的含量分别为:10×PCRBuffer 2.5μL,模板DNA20 ng,引物0.9μmol/L,dNTP 0.12 mmol/L,Mg2+1.5 mmol/L,Taq DNA聚合酶0.5 U,引物835号的最适退火温度为50.8℃。结果表明此反应体系标记位点清晰、稳定、重复性好。……   
[关键词]:冬虫夏草I;SSR;PCR;反应体系;优化
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《湖南农业科学2010年21期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)