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半套式RT-PCR法检测腹泻延边黄牛血液伤寒沙门氏菌试验

李杨;鞠玉琳;李佳佳

  为建立一种快速、特异性和实用性强、灵敏度高的沙门氏菌检测方法,参考GeneBank中登录号为U25631的沙门氏菌基因序列,设计并合成引物,组成半套式RT-PCR,扩增片段为581bp。应用该半套式RT-PCR对标准菌株伤寒沙门氏菌、大肠杆菌、链球菌、巴氏杆菌和结核杆菌及临床伤寒分离出的沙门氏菌H1、H2株进行检测,并对延边地区牧场的产生临床腹泻的延边黄牛血液中分离培养的不同菌株进行检测。结果表明,仅伤寒沙门氏菌标准株和临床一株样品在581bp处扩增出了特异的片段;该方法检测灵敏度为1fg核酸,且重复性好。说明此半套式RT-PCR法可以准确、灵敏、快速地检测出腹泻延边黄牛血液中的伤寒沙门氏菌。……   
[关键词]:半套式RT-PCR;延边黄牛;腹泻;血液;伤寒沙门氏菌
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《湖北农业科学2009年04期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)