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黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中的克隆与表达

周晓明;莫隽颖;陶冶;付水林;宫衡

  根据GenBank报道的黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因序列设计两对特异性引物,分别以黑曲霉H7总RNA及基因组DNA为模板,扩增出β-葡萄糖苷酶基因bgl全长及活性中心所在的外显子5序列E5,分别将其连接到pMD18-T载体并转化到大肠杆菌DH5α测序。结果表明,bgl序列全长2583 bp,与β-葡萄糖苷酶基因(XM001398779.1)核苷酸序列同源性为99%,氨基酸序列同源性为99%,E5与bgl外显子5区域同源性为100%。进一步构建表达质粒pET32a(+)-bgl、pET32a(+)-E5、pET28a(+)-E5,转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,并进行SDS-PAGE电泳分析。……   
[关键词]:黑曲霉;β-葡萄糖苷酶;序列分析;蛋白表达
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《化学与生物工程2010年06期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)