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银耳芽孢的诱导培养及其差异基因片段的克隆

聂燕华;王杰;林俊芳;郭丽琼

  为了探讨银耳芽孢内源诱导型启动子克隆的有效方法,克隆银耳芽孢诱导型差异基因片段,本研究采用乙醇和纤维二糖两种碳源对银耳芽孢进行诱导培养,对其生长情况进行了比较分析,并用cDNA-AFLP技术对差异培养的细胞进行差异表达基因克隆及分析。结果表明乙醇、纤维二糖诱导碳源培养银耳芽孢与葡萄糖相比具有很大差异,其中乙醇培养细胞脱氢酶类活性提高168%,纤维二糖培养细胞最大生长量减小32.2%。从两种差异培养的细胞中克隆得到14条特异性的差异表达基因片段,其中5条在乙醇、纤维二糖样品中各有表达的差异序列,与编码细胞色素C氧化酶、细胞色素b蛋白的基因序列同源,该基因的表达与乙醇代谢途径及胁迫诱导相关。银耳芽孢诱导培养及其诱导差异基因片段的克隆是建立食用菌诱导型表达系统一次有益尝试,为构建高效银耳生物反应器提供一定的理论参考。……   
[关键词]:银耳;芽孢;诱导剂;差异表达;cDNA-AFLP
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《现代食品科技2012年07期