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FLAG Pull-down技术筛选LASP-1相互作用蛋白

赵亮;丁彦青

  目的筛选与LASP-1蛋白发生相互作用的蛋白质。方法构建携带FLAG标签的LASP-1融合表达载体,转染人结直肠癌细胞系SW480表达FLAG-LASP-1融合蛋白,用FLAG-M2亲和柱筛选并经SDS-PAGE分析差异条带,切取差异条带酶解进行质谱鉴定。结果成功构建pcDNA3-FLAG-LASP-1真核表达载体,转染SW480细胞表达FLAG-LASP-1融合蛋白,SDS-PAGE电泳分离得到8个差异蛋白条带,质谱鉴定LASP-1相互作用蛋白78 kDa葡萄糖调控蛋白(GRP78)和热休克同源蛋白71(HSC71)。结论 GRP78、HSC71均可能与LASP-1存在相互作用,这将为进一步研究LASP-1的功能和作用机制提供依据。……   
[关键词]:LASP-1;FLAG Pull-down;相互作用蛋白;蛋白质组学
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《广东医学2010年17期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)