手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

用两种ELISA方法快速检测大菱鲆细菌性出血性败血症的病原菌

王斌;范薇;李艳;丁鉴锋;孙岑;刘永波

  以大菱鲆Scophthalmus maximus出血性败血症病原菌迟钝爱德华氏菌Edwardsiella tarda为抗原,从免疫家兔体内获得高免疫血清,建立快速检测大菱鲆出血性败血症病原迟钝爱德华氏菌的间接ELISA技术。采用棋盘滴定法确定间接ELISA抗原和抗血清的最适工作浓度分别为107个/mL和1∶20 000;最低检测菌浓度为104个/mL;抗血清与其他细菌标准菌株的交叉反应结果均为阴性,表明该方法具有较高的特异性。将该方法优化后检测了19尾人工感染出血性败血症并发病的大菱鲆和19尾健康的大菱鲆,阳性检测率分别为89.5%和的10.5%。同时在间接ELISA方法的基础上建立竞争ELISA检测技术,结果表明:理想的包被抗原浓度为107个/mL,兔抗血清的工作浓度为1∶20 000,酶标抗体工作浓度为1∶1 000,可测最适范围为2×105~2×108个/mL,最低检测菌浓度为2×105个/mL,得到回归方程y=-0.3811x+2.2335,R2=0.992。……   
[关键词]:大菱鲆出血性败血症;迟钝爱德华氏菌;间接ELISA技术;竞争ELISA技术
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《大连水产学院学报2008年04期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)