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海参肠碱性磷酸酶的提取及粗酶的特性研究

程菁恒;朱蓓薇;吴海涛;孙进健

  碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)是最重要的磷酸酶之一,在生物体内直接参与磷酸基团的转移和代谢过程。本文研究了海参肠碱性磷酸酶粗酶的提取,并分析了其酶学特性。经含有0.2%Triton X-100的Tris-HCl缓冲液(pH 8.9)浸提、正丁醇处理、70%硫酸铵沉淀和超滤等步骤获得海参肠ALP粗酶,纯化倍数达到2.74倍,得率为63.32%。ALP粗酶的最适反应pH为11.0,在pH 10.0~12.0稳定性较好;最适反应温度为45℃,在20~45℃具有很高的稳定性。金属离子Mg2+(1~30mmol/L)、Zn2+(<10mmol/L)对海参肠ALP粗酶具有显著的激活作用;Fe3+、Fe2+、Cu2+和Mn2+(10mmol/L)可明显抑制该酶活力。EDTA-Na2、DTT、Na2WO4及Na2HPO4对海参肠ALP粗酶有明显的抑制作用,抑制程度依次为:EDTA-Na2>DTT>Na2WO4>Na2HPO4。……   
[关键词]:海参肠;碱性磷酸酶(ALP);提取
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《大连工业大学学报2012年02期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)