手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

家蝇抗菌肽天蚕素基因的定点突变和高效表达质粒的构建

许小霞;徐兴耀;金丰良;张古忍;张文庆

  运用反转录聚合酶链式反应 (RT PCR)技术从家蝇体内扩增出抗菌肽天蚕素 (cecropin)基因的开放阅读框(ORF) ,与pMD 18T载体重组 ,经限制性酶切片段分析和核苷酸序列分析 ,与GenBank中报道的序列一致。根据此ORF ,重新合成 1对引物 ,并在碳末端进行定点突变 ,加上Asn编码 ,使其末端酰氨化 ,再利用半嵌套式PCR扩增出家蝇cecropin基因的成熟肽 ,与双酶切的酵母表达载体pPICZαA连接 ,经PCR和双酶切鉴定 ,成功构建了分泌型表达质粒。……   
[关键词]:家蝇;天蚕素;反转录聚合酶链式反应;开放阅读框;pPICZαA
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《蚕业科学2004年01期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)