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抗冻蛋白基因AFP表达载体构建及转化紫花苜蓿初报

郝凤;刘晓静;毛娟;于铁峰;张德罡

  以胡萝卜基因组DNA为模板,用PCR方法扩增目的基因,连接到PGEM-T Easy Vector载体上,经XbalⅠ和SacⅠ双酶切,将目的片段连接到PBI121工程质粒上,通过农杆菌介导法转化和田苜蓿,为提高紫花苜蓿的抗冻性奠定基础。结果表明,成功克隆出抗冻蛋白基因AFP,并构建成AFP植物表达载体。获得了具有卡那霉素抗性的苜蓿愈伤组织,和田苜蓿愈伤组织的最佳Kan筛选浓度为60 mg/L。经PCR技术鉴定,AFP抗冻蛋白基因已整合到苜蓿基因组中。……   
[关键词]:抗冻蛋白基因AFP;载体构建;遗传转化;紫花苜蓿
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《草地学报2009年06期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)