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杏树皮可溶性总蛋白的提取与浓缩方法探讨

张俊环;王玉柱;孙浩元;杨丽

  为从杏树皮组织中获取高质量的可溶性总蛋白,选择经过冬季自然低温驯化的1 a生杏树新梢为试材,比较分析提取缓冲液中分别添加2%SDS,不同浓度的Tween 20,以及高浓度PVPP对可溶性总蛋白提取浓度和质量的影响。结果表明:提取杏树皮可溶性总蛋白的最佳缓冲液体系为:5 mL 50 mmol/L的Tris-HCl缓冲液(其中含2 mM EDTA-Na2,10 mmol/L抗坏血酸,0.5 mmol/L DTT,0.1 mmol/L PMSF,1%(w/v)PVPP,pH 8.0)和0.5%Tween20。丙酮浓缩方法中加入蛋白粗提液2倍体积的冷丙酮是最理想的。经过提取和浓缩的蛋白浓度可达0.773μg/μL,电泳分析中的条带多而清晰,可用于后续的目的蛋白纯化试验及功能分析。……   
[关键词]:;树皮;可溶性总蛋白;提取
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《北方园艺2009年11期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)