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猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表达

刘成倩;肖长峰;易建中;关平原;吴双林;陈斌;张天庆

  [目的]克隆猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因并在原核表达系统中表达。[方法]根据GenBank上登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核酸序列设计1对引物,用RT-PCR方法扩增出PRRSV的核衣壳蛋白(N)基因,并将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上,得到重组质粒pGEX-4T-1-N。将重组质粒转化大肠杆菌BL31(DE3)感受态细胞,经TPTG诱导,SDS-PAGE电泳检测。[结果]PRRSV肺组织所提取的RNA,经RT-PCR扩增,得到一段392 bp的片段,与预期结果一致。SDS-PAGE电泳分析,所得重组蛋白的分子量约39.866 Da,与预期结果相同。重组菌体超声裂解后,经10%的SDS-PAGE电泳分析,结果显示该重组蛋白为可溶性蛋白。[结论]该研究为重组蛋白的纯化奠定了基础。……   
[关键词]:猪繁殖与呼吸综合征病毒;核衣壳蛋白;克隆;表达
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《安徽农业科学2009年22期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)