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人PTEN基因表达载体的构建及其在U_(251)细胞中的表达

欧阳松应;徐寿水;沈文律;周传香;李春艳;欧阳红生

  背景与目的 :克隆人野生型和突变型PTEN的cDNA并构建其表达载体 ,探讨该表达质粒在人星形胶质瘤细胞U251 中的表达情况。材料与方法 :分别从新鲜胎盘组织和结肠癌组织中提取总RNA ,采用RT_PCR的方法扩增人野生型和突变型PTEN基因全长cDNA ,分别克隆入pMD18_T载体上 ,经PCR、酶切鉴定均为阳性的克隆 ,进行核苷酸序列分析。再分别将两段基因定向克隆入 pcDNA3.1( +)载体中构建表达载体 ,转染入U251 细胞。 结果 :成功克隆了人野生型及突变型PTENcDNA并成功构建其表达载体 ,发现突变型PTEN蛋白对细胞生长无明显抑制作用 ,而野生型PTEN蛋白对细胞生长有明显抑制作用。结论 :PTEN可能能抑制肿瘤细胞生长 ,为后进一步开展PTEN对肿瘤相关功能的研究奠定基础……   
[关键词]:基因克隆;抑癌基因PTEN;基因;抑制;肿瘤;表达载体
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《癌变.畸变.突变2004年04期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)