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基因转染法建立bcl-2稳定表达的肝癌细胞株

杨连君;王文亮

  目的与方法 :为了建立稳定表达bcl 2蛋白的肝细胞癌 (简称肝癌 )细胞株 ,用脂质体介导的基因转染法将含有人bcl 2cD NA的逆转录病毒表达载体 pDOR SB质粒导入bcl 2蛋白阴性的肝癌细胞系HCC 92 0 4细胞中。经G 418筛选后获得转入bcl 2基因的细胞克隆。细胞扩大培养后用免疫细胞化学法检测bcl 2表达情况。有限稀释法连续克隆化直至获得 10 0 %稳定表达bcl 2蛋白的单克隆细胞株 ,并进行流式细胞仪检测。结果 :转染了pDOR SB的HCC 92 0 4细胞大部分为bcl 2蛋白表达阳性 ,而转染了 pDOR空载体或未转染的HCC 92 0 4细胞均为bcl 2蛋白阴性。经过连续 3次克隆化后 ,流式细胞仪检测表明所获得的单克隆细胞株 10 0 %表达bcl 2蛋白。结论 :用基因转染法成功地建立了稳定表达bcl 2蛋白的肝癌细胞株。……   
[关键词]:bcl-2;肝细胞癌;基因转染;基因表达
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《癌变.畸变.突变2001年02期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)