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活血化瘀方剂对急性高眼压大鼠视网膜BDNF、HO-1、GLAST蛋白表达的影响

孙娟

   目的检测中药活血化瘀方剂对急性高眼压大鼠视网膜脑源性神经营养因子BDNF、血红素氧合酶-1H0-1和谷氨酸转运体GLAST蛋白表达的影响。 方法健康清洁型Wistar大鼠90只,随机分为A、B两组,各45只。A组用于HE染色,B组用于Western Blotting。每组又分9小组,均用左眼。以A组为例,A0为正常对照组,A1-A4为实验对照组,即单纯加压组,A5-A8为实验组,即中药治疗组。A0组不作处理,A1-A8组大鼠左眼用前房灌注加压法制作急性高眼压模型,A1-A4组分别于造模后1d,3d,7d,14d,用过量10%水合氯醛腹腔注射处死动物,取左眼眼球。A5-A8组造模后立即给予活血化瘀方剂灌胃,每日两次,一次2ml,分别于给药后1d,3d,7d,14d处死动物,取左眼眼球。B组分组与处理同上,最后取左眼视网膜。 结果1、光学显微镜:单纯加压组,模型制作后1d时,视网膜全层高度水肿,厚度增加,视网膜神经节细胞(RGCs)排列疏松,核周出现空泡变性;造模后3d时,视网膜水肿较1d组减轻,RGCs数目减少;造模后7d时视网膜水肿消失,开始变薄,RGCs排列更加疏松,造模后14d视网膜结构紊乱,厚度明显变薄,RGCs数目极少。中药治疗组同时间点的变化趋势与加压组相同,但损伤程度均轻于单纯加压组。 2、Western Blotting结果: BDNF:(1)单纯加压组中,BDNF的蛋白相对表达量在造模后1d时开始升高,并达到高峰(P<0.01),造模后3d时较1d有所下降,但仍较正常对照组高(P<0.01),造模后14d时降至最低,低于正常对照组(P<0.01);(2)中药治疗组中,同时间点的蛋白相对表达量变化趋势同加压组,并且均比同时间点的加压组高,差异有统计学意义(P<0.01),其中治疗后14d时降至正常水平,与正常对照组相比差异无显著性(P>0.05)。 HO-1:(1)单纯加压组中,HO-1的蛋白相对表达量在造模后1d时明显升高且达高峰,可达正常对照组的4倍,差异有高度显著性(P<0.01);造模后3d时相对表达水平下降至正常水平;造模后7d时再次升高,与正常对照组比差异有显著性(P<0.01);造模后14d时继续升高。(2)中药治疗组中,各时间点与正常对照组比较差异均有显著性(P<0.01);与同时间点的加压组相比,蛋白相对表达量均高,差异有高度显著性,(P<0.01),且变化趋势相同。 GLAST:(1)单纯加压组中,GLAST的蛋白相对表达量在造模后1d时开始升高,并达到高峰,与正常对照组比差异有高度显著性(P<0.01),造模后3d时相对表达量下降,仍高于正常对照组(P<0.01),造模后7d时降至正常水平(P>0.01),造模后14d时维持正常水平。(2)中药治疗组中,治疗后1d、3d组与正常对照组比较差异有高度显著性(P<0.01),且高于同时间点的单纯加压组(P<0.01);治疗后7d时降至正常水平(P>0.01),治疗后14d时维持正常水平。 结论急性高眼压时,活血化瘀方剂可以通过增强视网膜中BDNF、HO-1、GLAST的蛋白表达,保护视神经。……   
[关键词]:活血化瘀方剂;高眼压;脑源性神经营养因子;血红素氧合酶-1;谷氨酸转运体;蛋白表达
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:青岛大学2010年