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防龋天然药物的筛选及其粗提物对变链菌的体外作用研究

俞晓峰

   我国天然药物资源丰富、来源广泛、毒副作用小、具有杀菌消炎等作用,因而广泛应用于临床。龋病是口腔最常见的细菌感染性疾病之一,其中变异链球菌(streptococcus mutans, S.mutans)是最主要的病原菌。本研究通过文献检索等方法筛选出100种天然药物,观察其粗提物对S.mutans体外生长的影响,评估其抑菌效果。选择两种抑菌效果好的的天然药物粗提物,进一步研究它们对S.mutans的体外粘附、产酸作用,为进一步研究天然药物的防龋作用和防龋药物的开发提供科学依据。 目的:通过体外初筛抗S.mutans的药物,并对其进行深入的研究,以期探索新的有效的防龋天然药物。 方法:通过查阅书籍和文献,选择100种记载有抗菌消炎作用的天然药物,遵循天然药物提取和细菌药物敏感实验原则,运用酶标仪测定不同浓度药物在不同时间段(加入菌悬液前、后以及厌氧培养48小时之后)光密度值(optical density, OD),比较其差值变化情况,初步了解其粗提物对S.mutans体外生长的抑制效果。对实验结果进行分析研究,并从中选出20种天然药物,然后采用提取同一批次不同时间以及不同批次同一种药物,重复实验,验证这20种天然药物粗提物对S.mutans生长的抑制作用,经统计学检验(Dunnett t检验)确定其最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC),再从中选出两种重复性最好的天然药物,进一步研究其粗提物对S.mutans的体外粘附、产酸作用(单因素方差分析和Dunnett t检验)。 结果:1.阳性对照组中经48小时厌氧培养后的OD值与48小时前的OD值差值均>1.0,实验组48小时厌氧培养后与48小时前的OD值差值明显的有:黄柏、马兜铃、大黄、赤芍、木香、茵陈、紫苏梗、杜仲、九节菖蒲、稻芽、当归、花椒、虎杖、地肤子、山豆根、黄连、白芍、使君子、苍耳子、黄芪、白藓皮、甘草、丁香、白芷、葛根、车前草、白花蛇舌草等。 2.选出的20种天然药物中,当黄柏、马兜铃、大黄、赤芍、木香、茵陈、紫苏梗、杜仲>12.50(mg/ml)、九节菖蒲、稻芽、当归、花椒、虎杖>6.25(mg/ml)、地肤子、山豆根、黄连、白芍、使君子、苍耳子>3.13(mg/ml)、黄芪>0.78(mg/ml)时,均对S.mutans的体外生长具有抑制作用(P<0.05)。 3.将不同浓度的九节菖蒲和当归粗提物用于S.mutans体外粘附实验,数据分别做单因素方差分析,发现:九节菖蒲和当归粗提物浓度分别≥0.78mg/ml和1.56mg/ml时,它们对S.mutans的体外粘附能力具有抑制作用(P<0.05)。 4.将不同浓度的九节菖蒲和当归粗提物对S.mutans体外产酸实验发现,九节菖蒲和当归粗提物浓度分别≥0.78mg/ml和1.56mg/ml时,它们对S.mutans体外产酸具有抑制作用(P<0.05)。 结论:当九节菖蒲粗提物浓度≥0.78mg/ml,当归粗提物浓度≥1.56mg/ml时,它们对S.mutans体外生长抑制、体外粘附和产酸均有不同程度作用。……   
[关键词]:天然药物;;变异链球菌;粘附;产酸
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:福建医科大学2010年