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丝素材料装载碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)后的促细胞生长作用

刘雨

   近年来家蚕丝素由于其独特的理化性能已被作为组织修复用生物材料进行,在用作细胞培养载体、伤口辅料、人工皮肤及组织工程支架材料等方面已显示出良好的效果和潜在开发应用前景。生长因子亦为近年来的关注热点。碱性成纤维生长因子(bFGF)能够促进了毛细血管增生,改善局部微循环及组织营养状况,促进肉芽组织迅速生长,促使创面愈合。本文对装载碱性成纤维生长因子(bFGF)的家蚕丝素膜和多孔材料的体外促进细胞生长作用以及其对SD大鼠背部真皮缺损创面的修复作用进行研究。 制备装载bFGF的家蚕丝素膜,通过体外细胞培养,研究了L929细胞在装载bFGF的家蚕丝素膜的生长情况,细胞形态观察和MTT比色法的测定结果表明细胞种植天数相同的情况下,装载bFGF的家蚕丝素膜上细胞的活力大于未装载bFGF的家蚕丝素膜和胶原对照组。 冷冻干燥法制备装载bFGF的丝素多孔材料,用该材料作为培养L929细胞的载体,MTT测定细胞活力,结果表明该材料对细胞的生长和增殖有促进作用。共聚焦显微镜(CLSM)观察结果显示,L929细胞在装载bFGF的丝素多孔材料上的增殖好于未装载bFGF的丝素多孔材料。在细胞接种密度相同时,CLSM观察L929细胞转染携带绿色荧光蛋白(GFP)的Ad-GFP-VEGF165腺病毒的结果可知,在装载bFGF的丝素多孔材料中生长的L929细胞的转染效率优于未装载bFGF的丝素多孔材料上的L929细胞的转染效率。 在SD大鼠真皮缺损部位植入装载bFGF的丝素多孔材料和未装载bFGF的丝素多孔材料,在植入后第5,11,15,28天分别取材料植入部位及附近组织标本,进行HE染色和Masson染色,观察其炎症反应、成纤维细胞数量、新生毛细血管数量、材料与新生组织的融合情况和新生组织的形态。结果表明,无论是装载bFGF的丝素多孔材料还是未装载bFGF的丝素多孔材料其炎症反应均轻微,能够支持大鼠真皮组织的再生,15天时在多孔材料与组织的交界处就有较丰富的新生毛细血管,随着时间的延长,新生毛细血管、成纤维细胞数、胶原纤维的数量均增加;丝素材料对细胞增殖和血管形成具有积极的作用,装载bFGF的丝素多孔材料更能引导新生血管长入、诱导真皮组织的再生。……   
[关键词]:家蚕;bFGF;丝素膜;多孔材料;促细胞生长
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:苏州大学2010年