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前列腺素E1对大鼠小肠缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

王鹏

   目的:通过应用前列腺素E1对大鼠小肠缺血/再灌注损伤影响的研究,从肠粘膜的损伤程度,促炎因子和抗炎因子的释放,以及细菌移位等不同方面探讨前列腺素E1对大鼠小肠缺血再灌注损伤的是否具有保护作用,从而为临床防治小肠缺血再灌注损伤提供一个新的策略。 方法:SPF级健康成年雄性SD大鼠80只,体重280g-320g,随机分为假手术(Sham group, S)组、缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury, IRI)组、缺血预处理组(ischemia preconditioning, IPC)和前列腺E1(Prostaglandin E1,PGE1)组(n=20),每组根据再灌注后采集标本的时间分为两个亚组(n=10),实验前12h使大鼠禁食,自由饮水,并于实验前2h行含绿色荧光素蛋白大肠杆菌(Ecdi DH5α)2ml灌胃。 ①S组:麻醉后取腹正中切口,长约3cm,分离肠系膜上动脉(SMA)后关腹; ②IRI组:同S组分离SMA后,用无创微动脉夹夹闭SMA后关腹,45min后取出动脉夹,分别于再灌注2h、4h时采集标本; ③IPC组:同S组分离SMA后,给予SMA 3个循环的预处理(缺血2min后再灌注2min为一个循环)后关腹,余同IRI组; ④PGE1组:同S组分离SMA后,用无创微动脉夹夹闭SMA后关腹,缺血45min后,于再灌注前5min经尾静脉按20ug/kg注入PGE1,余同IRI组。 ELISA法检测血清中IL-1β,IL-6,IL-10和TNF-α的含量,同时取回肠壁组织长1cin行肠粘膜病理学检测并行HE染色,取肝脏组织、脾脏组织及门静脉血行细菌移位检测。 结果: 1、小肠病理变化:S组大鼠肠绒毛完整,排列整齐,镜下无中性粒细胞浸润。IRI组大鼠在再灌注2h和4h后小肠绒毛上皮顶端与固有层分离并见固有层毛细血管暴露、出血和溃疡,粘膜绒毛坏死,脱落,镜下见大量中性粒细胞浸润。与IRI组相比,IPC组和PGE1组在各时间点肠粘膜绒毛损伤减轻,坏死,脱落少见,镜下中性粒细胞浸润轻。IPC组和PGE1组损伤评分明显低于IRI组(P<0.05),IPC组和PGE1组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。 2、细胞因子改变:IRI组、IPC组和PGE1组再灌注2h、4h,大鼠动脉血清中炎性细胞因子IL-1β,IL-6,TNF-α含量明显高于S组(P<0.05);IPC组和PGE1组IL-1p,IL-6,TNF-a则低于IRI组(P<0.05);IPC组和PGE1组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。大鼠动脉血清中抗炎因子IL-10含量在IRI组、IPC组和PGE1组各时间点明显低于S组(氏0.05);IPC组和PGE1组各时间点高于IRI组(P<0.05);IPC组和PGE1相比,差异无统计学意义(P>0.05)。 3、细菌移位改变:再灌注2h、4h,S组大鼠脾脏、肝脏及门静脉血未检出移位细菌生长;IPC组和PGE1组明显低于IRI组(P<0.05),IPC组和PGE1组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。 结论: PGE1和IPC能减轻大鼠小肠缺血再灌注损伤后小肠粘膜绒毛的坏死程度:PGE1和IPC能抑制大鼠小肠缺血再灌注损伤后促炎细胞因子(IL-1p,IL-6,TNF-α)的释放和促进抗炎细胞因子IL-10的表达:PGE1和IPC能减少大鼠小肠缺血再灌注损伤后的细菌移位。……   
[关键词]:大鼠;前列腺素E1;小肠;缺血再灌注;缺血预处理;细菌移位
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:昆明医学院2010年