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犬α-干扰素的表达及其治疗犬病毒性肠炎临床疗效观察

王红

   犬细小病毒(Canine Parvovirus, CPV)为单链DNA病毒,基因组全长5323 nt,只含有3个读码框,分别编码为VP1 (70~90ku)、VP2 (62~76ku)和VP3(39~69ku),其中VP2是构成衣壳蛋白的主要部分。它是一种自主性复制病毒,主要引起犬心肌炎、出血性肠炎和肺病变,并导致犬的大量死亡,给养犬业和宠物业带来巨大损失,因此早期预防和及时治疗十分重要。 采用犬干扰素治疗犬病毒性疾病是一种有效的手段,干扰素通过阻断病毒的繁殖及复制,以及刺激动物产生足够的内源性干扰素达到消除病毒的作用,治疗犬病毒性肠炎具有良好的临床疗效。但由于犬干扰素价格昂贵,并且兽医们对它的认识仍然不够,目前,犬干扰素用于各种类型病毒感染犬治疗效果的大样本研究报道较少。因此本课题研究了犬的α干扰素,成功构建了pET32a-CaIFN-α重组质粒,并转入大肠杆菌BL-21中,经IPTG诱导后,表达出了重组犬α干扰素,表达产物为-N-端含His的37ku左右的融合蛋白。经薄层扫描分析目的蛋白表达量占菌体总蛋白的30%。Western blotting印迹证实了表达产物具有抗原抗体结合能力。并通过提取包涵体法和镍琼脂糖凝胶法对表达产物进行变性、纯化和复性,获得了纯度较高的重组犬α干扰素。 另一方面,对犬α干扰素在临床上的应用进行了研究,研究犬均来自北京市昌平区动物疫病预防控制中心宠物门诊。对就诊于宠物门诊且患病毒性肠炎的犬542例,随机分成两组,对照组256例,予口服庆大霉素、思密达、纠正水电解质及酸碱平衡紊乱治疗。治疗组286例,在上述治疗基础上,予肌注干扰素-α(400万单位,1次/日,共5天)。结果,干扰素组退热时间、呕吐消失时间、腹泻持续天数和静脉补液所需天数,均比对照组明显缩短(P<0.001);脱水纠正所用时间比对照组短,但两组间比较无明显差异(P>0.05)。通过本研究可以得出犬a干扰素治疗犬病毒性肠炎具有良好的临床效果。……   
[关键词]:犬病毒性肠炎;犬α干扰素;表达;治疗;疗效
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:中国农业科学院2009年