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蔬菜根结线虫生防真菌的筛选、鉴定及应用研究

方治

   蔬菜根结线虫是当前中国最重要的农作物病原线虫之一,每年给农业造成巨大的经济损失。化学杀线虫剂带来了环境污染和生态平衡破坏等问题。利用生防菌防治蔬菜根结线虫病是一种安全有效的方法。开展根结线虫活性抑制真菌的筛选鉴定及生物防治研究,为开发新型生防因子防治蔬菜根结线虫病奠定了基础。 1蔬菜根结线虫生防真菌的分离和筛选 使用选择性培养基,从53个土壤样品中分离得到316株真菌菌株,在PS培养基中发酵培养,使用发酵液处理甘薯茎线虫。结果表明:大部分菌株发酵液在24h对甘薯茎线虫2龄幼虫(J2)都有一定的抑制作用;ZB-4、ZW-3、XX-8三株菌株稀释2倍发酵液对2龄幼虫始终保持较高的抑制活性,24h和72h的抑制率都达到80%以上。 2三株真菌代谢物对蔬菜根结线虫的生物防治研究 利用ZB-4、ZW-3、XX-8三株菌株代谢物对蔬菜根结线虫2龄幼虫进行室内离体试验和温室盆栽试验。结果表明:ZB-4、ZW-3、XX-8三株真菌菌株不同稀释倍数代谢物在24h、48h、72h对根结线虫都有一定的抑制作用。其中,三株菌株稀释二倍发酵液在72h对根结线虫2龄幼虫的校正抑制率分别为95.27%、91.27%、86.58%;稀释四倍发酵液在72h对根结线虫2龄幼虫的校正抑制率分别为68.52%、84.05%、60.33%。在温室盆钵试验中,使用ZB-4、ZW-3、XX-8三株菌株2倍发酵液处理番茄苗,与对照相比,45d后线虫减退率分别达到46.70%、43.30%、36.70%,防治效果分别达到23.81%、19.52%、35.71%。此外,22d和45d调查显示, 2倍发酵液对番茄生长还有一定的促进作用。 3三株菌株的鉴定及培养特性研究 蔬菜根结线虫活性抑制菌ZB-4、ZW-3、XX-8经形态学特征观察、rDNA-ITS基因序列测定、系统发育树构建表明,ZB-4、ZW-3、XX-8分离株均属于毛霉属真菌。 通过观察在不同温度和不同培养基上菌株的生长情况表明,三株菌株在PDA培养基上生长速度较快,在WA培养基上生长速度较慢。在20℃产孢时间较短。 4几株根结线虫生防真菌核糖体DNA内转录间隔(rDNA-ITS)序列特征分析 对分离得到的高效抑制菌株14株,测定rDNA-ITS基因序列,构建系统发育树,结果表明,5-8、BLZW-3、NGHG-7、1-2、Ⅱ-2-5、1-1-6、HN-11、XXHS-3为毛霉属真菌;菌株SDY-12、V-2-3、8-2-1为隐球酵母科真菌;推测SM-3为红曲霉;18-1、GSR菌株为曲霉属真菌。……   
[关键词]:蔬菜根结线虫;真菌代谢物;分离;筛选;鉴定;培养特性;生物防治
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:华中农业大学2009年