手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

安神方治疗失眠症的疗效观察及相关机制研究

吴海波

   背景 自古以来,人类就对睡眠和梦产生了浓厚的兴趣。从西方的佛洛依德所著《梦的解析》开始,人类对睡眠和梦的探究从来没有停止过。睡眠作为人生命的重要组成部分,对人体保持充沛的精力体力,维持神经系统、内分泌系统、免疫系统功能正常均具有重要意义。 近年来,经济社会变革加速,人们的生活工作节奏均大幅加快,负面情绪引起的精神紧张焦虑、抑郁更是频繁发生,导致失眠症发生日益频繁。失眠(insomnia)是指睡眠的始发(sleep onset)和睡眠维持(sleep maintenance)发生障碍,致使睡眠质量不能满足个体生理需要而明显影响患者白天活动(如白天困倦乏力、记忆力注意力下降等)的一种睡眠障碍综合征。 现代医学对失眠的研究发现睡眠的发生和维持与视交叉上核、下丘脑、脑干网状上行系统以及松果体等部位,与乙酰胆碱(ACH)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、单胺类、氨基酸类神经递质以及退黑激素(melatonin,MT)、前列腺素(Prostaglandin,PG)、白介素(interleukin,IL)等物质,均存在密切联系。 目前失眠症的临床治疗仍以BZD类镇静催眠药物为主,在改善失眠症状的同时,往往伴有不同程度毒副作用并容易形成药物依赖。祖国中医药的整体辩证论治方法,调整人体机能状态的同时达到改善睡眠的治疗方法,为失眠症患者带来了福音。导师陈宝田教授在研读中医经典《伤寒论》过程中,结合临床实践在“柴胡桂枝汤”的基础上创立了“安神方”,治疗失眠症疗效确切,同时对改善患者焦虑、抑郁等精神疾患办有疗效。在前期临床观察的基础上,我们设计本实验旨在系统地观察安神方治疗失眠症的临床疗效,并进一步通过动物实验探讨安神方治疗失眠症的作用机理,为安神方的开发提供可靠的理论和临床依据。 第一章安神方治疗失眠症临床观察 目的通过临床观察探讨安神方治疗失眠症的临床效果。观察失眠症症侯疗效,临床整体疗效以及多导睡眠图(PSG)检查客观结果,客观的评价安神方治疗失眠症的效果。 方法 1、病例与分组符合纳入标准的失眠症患者80例,随机方法分为安神方治疗组和枣仁安神胶囊对照组; 2、用药治疗组安神方颗粒剂每日1剂,1次/晚;对照组枣仁安神胶囊每次4粒,1次/晚。睡前1小时服药,时间4周。(安神方,由南方医院中药房提供,由广东一方制药生产,许可证号:粤zbx20060360;枣仁安神胶囊,由南方医院药房提供,贵州同济堂制药有限公司生产,国药准字号Z20010033); 3、中医症候疗效评价在中医症候评分基础上,比较治疗前后主要症状(睡眠时间,入睡困难,易醒,多梦,困倦乏力)改善等级,采用非参数检验方法,分析评价各组症状的改善; 4、临床整体疗效评价根据治疗前后总评分,计算反应总体改善情况的“疗效指数”,评定每例患者改善等级,以此评价两组治疗的整体疗效; 5、临床多导睡眠图疗效评价以分钟(min)为单位记录两组治疗前后总睡眠时间(TST)、睡眠潜伏时间、觉醒次数,浅睡眠时间(S1+S2),深睡眠时间(S3+S4)及REM睡眠时间。分别进行治疗前差异比较(两独立样本t检验)、组内治疗前后症状比较(两配对样本t检验)、治疗后组间症候疗效比较(协方差分析); 6、安全性评价治疗前后检查体温,心率,血压,呼吸;血、尿、便常规检查;肝、肾功能检查;心电图检查; 7、统计分析采用统计软件SPSS13.0进行统计学处理和分析。实验数据计量资料采用均数加减标准差((?)±S)表示。治疗前后剂量资料比较采用两配对样本t检验;两组间计量资料比较采用两独立样本t检验;治疗后组间症候疗效比较采用协方差分析;等级资料分布情况采用秩和检验及非参数检验。计数资料以百分率表示,采用卡方检验。所有统计数据均以P<0.05作为差异有显著性差异的界限。 结果 1、一般资料两组在性别(χ~2=0.213,P=0.646)、年龄(F=1.798,P=0.184)、病程(t=1.031,P=0.306),方面比较无显著性差异(P均>0.05),具有可比性; 2、症候疗效评价两组对“睡眠时间”的疗效对照(Z=-0.633,P=0.527),观察两组对“入睡困难”的疗效对照(Z=-1.716,P=0.086),观察两组对“多梦”的疗效对照(Z=-1.115,P=0.265),均无显著性差异;观察两组对“易醒”症状的疗效对照(Z=-2.285,P=0.022),对“困倦乏力”症状的疗效对照(Z=-2.856,P=0.004),均有显著性差异; 3、整体疗效评价两组治疗对失眠症整体疗效的比较(Z=-2.130,P=0.033),有显著性差异,治疗组总体疗效优于对照组; 4、多导睡眠图(PSG)疗效评价 治疗前两组间,对“总睡眠时间”疗效比较(t=-0.153,P=0.879);“睡眠潜伏时间”疗效比较(t=-0.400,P=0.691);“觉醒次数”疗效比较(t=-0.733,P=0.467);“浅睡眠时间”疗效比较(t=0.290,P=0.773);“深睡眠时间”疗效比较(t=.1.021,P=0.312);“REM睡眠时间”疗效比较(t=.0.425,P=0.673),均无显著性差异。说明两组具有可比性; 治疗前后,治疗组内各症状比较结果:对“总睡眠时间”疗效比较(t=-3.534,P=0.002),“觉醒次数”疗效比较(t=2.753,P=0.011),“深睡眠时间”疗效比较(t=-4.853,P=0.000),“REM睡眠时间”疗效比较(t=-4.596,P=0.000),均有显著性差异;对“睡眠潜伏时间”疗效比较(t=1.572,P=0.129),“浅睡眠时间”疗效比较(t=0.409,P=0.686),无显著性差异。说明治疗组具有“增加总睡眠时间、深睡眠时间、REM睡眠时间,减少觉醒次数”的效果; 对照组内各症状比较:对“总睡眠时间”疗效比较(t=-2.757,P=0.011),“睡眠潜伏时间”疗效比较(t=2.324,P=0.029),“浅睡眠时间”疗效比较(t=-2.396,P=0.025),均有显著性差异;“觉醒次数”疗效比较(t=1.821,P=0.081),“深睡眠时间”疗效比较(t=-1.846,P=0.077),“REM睡眠时间”疗效比较(t=-1.028,P=0.314),均无显著性差异。说明对照组具有“增加总睡眠时间、缩短睡眠潜伏期、增加浅睡眠时间”的效果; 治疗后两组间疗效比较,对“总睡眠时间”疗效比较(F=0.394,P=0.533),对“睡眠潜伏时间”疗效比较(F=1.633,P=0.208),两组对“觉醒次数”的疗效比较(F=1.053,P=0.310),均无显著性差异;对“浅睡眠时间”的疗效(F=9.042,P=0.004),对“深睡眠时间”的疗效比较(F=4.887,P=0.032),对“REM睡眠时间”的疗效比较(F=8.441,P=0.006),均有显著性差异;说明治疗组增加深睡眠时间、REM睡眠时间的疗效优于对照组;对照组增加浅睡眠时间疗效优于治疗组。 结论 1、安神方治疗对改善“易醒,困倦乏力”症状的疗效优于对照组,治疗失眠症的整体疗效优于对照组; 2、安神方对“总睡眠时间、觉醒次数、深睡眠时间、REM睡眠时间”症状的改善,具有显著疗效;与对照组比较,改善“深睡眠时间、REM睡眠时间”的疗效显著。其对睡眠结构的调整主要是增加了“深睡眠时间”及“REM睡眠时间”;致使“总睡眠时间”增加; 3、安全性指标观察各项检查指标无异常。 第二章安神方治疗失眠症的相关机制研究 一、安神方对失眠造模大鼠中枢氨基酸类神经递质的影响 目的观察安神方对大鼠中枢氨基酸类神经递质含量的影响,探讨其治疗失眠症的机理。 方法 1、实验动物与分组清洁级Wistar大鼠60只,体重(200±20g),南方医院实验动物中心提供,许可证号:(粤)2006-0015。按随机方法分成高剂量组、中、低剂量组和生理盐水对照组,共4组; 2、给药高剂量组大鼠每天按40g.Kg~(-1)灌胃,中剂量组大鼠每天按20g.Kg~(-1)灌胃,低剂量组大鼠每天按10g.Kg~(-1)灌胃,生理盐水组给予等量生理盐水灌胃。失眠造模同时连续给药15天; 3、失眠大鼠模型制备方法本实验采用‘限制运动法 制作大鼠失眠模型:将大鼠置于自制的大鼠运动限制仪内,通过移动插片控制大鼠的活动空间。每日束缚制动1次,第一次4h,其后每次增加1h,连续15d完成。大鼠在制动期间禁食、禁水; 4、中枢氨基酸类神经递质检测方法处死并分离大鼠海马及下丘脑。称重,玻璃匀浆器匀浆化;离心取上清液,采用“高效液相色谱荧光检测法”检测中枢氨基酸类神经递质; 5、仪器和试剂 仪器及试剂:DIONEX Summit高效液相色谱仪(美国DIONEX公司),Chromeleon色谱工作站(美国DIONEX公司),RF2000荧光检测器(美国DIONEX公司),PHS-2C精密酸度计(上海理达仪器厂),冷冻离心机(Avanti 30),电子天平(BA 110S)。谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)、OPA(内含2-ME)均购自美国SIGMA公司,批号分别为43907190、026K07361、116K5005;乙腈购自美国TEDIA公司;其余试剂均为市售分析纯; 6、实验数据计量资料采用((?)±S)表示;采用统计软件SPSS13.0进行统计学描述和分析。多组间比较采用单因素方差分析(One-Way ANOVA)检验;方差齐时采用LSD方法检验;方差不齐时采用非参数Kruskal-Wallis检验。所有统计数据均以P<0.05作为差异有显著性的界限。 结果 1、海马γ-氨基丁酸(GABA)含量高剂量组与生理盐水组比较(P=0.002),中剂量组与生理盐水组比较(P=0.017),低剂量组与生理盐水组比较(P=0.045),均有显著性差异,治疗组GABA含量高于对照组; 2、海马谷氨酸(GLU)含量:高剂量组与生理盐水组比较(P=0.011),中剂量组与生理盐水组比较(P=0.045),均有显著性差异,治疗组GLU含量低于对照组;低剂量组与生理盐水组比较(P=0.566),无显著性差异; 3、下丘脑γ-氨基丁酸(GABA)含量:高剂量组与生理盐水组比较(P=0.001),中剂量组与生理盐水组比较(P=0.028),均有显著性差异,治疗组GABA含量高于对照组;低剂量组与生理盐水组比较(P=0.166),无显著性差异; 4、下丘脑谷氨酸(GLU)含量:高剂量组与生理盐水组比较(P=0.015),有显著性差异,治疗组GLU含量低于对照组;中剂量组与生理盐水组比较(P=0.103),无显著性差异;低剂量组与生理盐水组比较(P=0.798),无显著性差异。 结论安神方治疗组能增加大鼠海马、下丘脑中γ-氨基丁酸(GABA)含量,降低谷氨酸(GLU)含量;调节中枢氨基酸类神经递质是安神方治疗失眠症的机制之一。 二、安神方对睡眠剥夺大鼠血清皮质醇的影响 目的观察安神方对应激条件下动物的焦虑症状的调节作用。 方法 1、动物及分组清洁级Wistar大鼠30只,8周龄,雄性,体重(300±30g),南方医院实验动物中心提供,许可证号:(粤)2006-0015。随机方法分为2组,每组15只; 2、试验药物中药安神方,由南方医院中药房提供。治疗组大鼠每天按20g.Kg~(-1)灌胃(剂量按成人换算),生理盐水组给予等量生理盐水;每天灌胃1次; 3、睡眠剥夺大鼠模型制备采用“改良多平台睡眠剥夺法”进行睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)。室温保持20-25℃,正常昼夜光照,每日更换睡眠剥夺用水,保持自由进食条件; 4、试验步骤:持续睡眠剥夺72h,两组分别在睡眠剥夺(SD)Oh,24h,48h和72h时,记录各组动物体重,并采血检测血清皮质醇。血清皮质醇测定方法:于早晨7时经尾静脉取血0.5ml,置离心管中以3000r/min离心10min,取上清液保存于低温冰箱(-60℃)待检测; 5、资料整理与统计学方法:采用统计软件SPSS13.0进行统计学处理和分析。治疗前后指标差值采用协方差分析(analysis of covariance,ANCOVA),不同时间点数据变化采用重复测量数据的方差分析(ANOVA for the repeated measures)和独立样本t检验进行比较(Independent-Samples T Test)。所有统计数据分析均以P<0.05作为差异有显著性的界限。 结果 1、两组治疗前后体重变化比较(F=79.682,P=0.000),有显著性差异; 2、第1,2天治疗组和对照组的体重比较无显著性差异(第1天:t=-0.429,P=0.671;第2天:t=1.835,P=7.077),而在第3,4天两个时间点上,两组的体重比较均有显著性差异(第3天:t=3.675,P=0.001;第4天:t=5.675,P=0.00)。治疗组和对照组体重在不同时间点之间差异有显著性差异(F=460.01,P=0.000)。分组与时间之间存在交互作用(F=70.22,P=0.000); 3、两组治疗前后皮质醇含量比较(F=70.601,P=0.000),有显著性差异; 4、第1,2天治疗组和对照组的血清皮质醇比较无显著性差异(第1天:t=-0.372,P=0.712;第2天:t=-0.699,P=0.490),而在第3,4天两个时间点上,两组的血清皮质醇比较均有显著性差异(第3天:t=-3.247,P=0.003;第4天:t=-4.770,P=0.000)。治疗组和对照组血清皮质醇在不同时间点之间差异有显著性差异(F=128.94,P=0.000)。分组与时间之间存在交互作用(F=29.846,P=0.000)。 结论 1、治疗组体重减轻速度慢于生理盐水对照组; 2、治疗组血清皮质醇含量增加的速度慢于生理盐水对照组; 3、安神方治疗可以减轻睡眠剥夺大鼠的焦虑症状。……   
[关键词]:失眠症;安神方;疗效观察;多导睡眠图;机制研究
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:南方医科大学2009年