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α晶状体蛋白分子伴侣对实验性白内障作用及干预研究

邱斌

   白内障的发病机制较为复杂,与多种因素相关。晶状体中最重要的结构蛋白是晶状体蛋白,占晶状体水溶性蛋白的90%。晶状体蛋白由2大家族组成,α晶状体蛋白和βγ晶状体蛋白。其中α晶状体蛋白含量最高,约占晶状体总蛋白的65%。 一些研究证明α晶状体蛋白具有分子伴侣活性,主要表现为抑制蛋白质凝聚和抑制酶的失活。但是以往研究较注重晶状体蛋白本身特性,而对于在白内障发病过程中的分子伴侣活性的研究并不多。而萘性白内障模型是比较成熟的研究白内障机制的模型。因此我们选用这一模型来研究α晶状体蛋白的分子伴侣活性及药物对其干预作用。 第一部分 目的研究萘性白内障体外模型中αA晶状体蛋白的分子伴侣活性变化。 方法分离大鼠晶状体,分为正常对照组、萘性白内障组两组体外培养。高压液相色谱柱层析法分离纯化αA晶状体蛋白。检测对牛乳酸脱氢酶热稳定性的保护作用来表示其分子伴侣功能。 结果用5×10~(-5) mol/L萘酚加入培养液后,可以在观察到大鼠晶状体形成萘性白内障,培养3天后混浊明显。αA晶状体蛋白热稳定性正常组的为46.25%±0.27,萘性白内障组为25.9%±0.11,统计分析P<0.001。 结论萘酚能诱导体外培养大鼠晶状体形成白内障,且降低了αA晶状体蛋白的分子伴侣活性。 第二部分 目的研究萘性白内障体外模型中,阿司匹林对αA晶状体蛋白的分子伴侣活性的影响。 方法分离大鼠晶状体,随机分为正常对照组、萘性白内障组、阿司匹林组3组体外培养。高压液相色谱柱层析法分离纯化αA晶状体蛋白。检测αA晶状体蛋白对牛乳酸脱氢酶热稳定性的保护作用来表示其分子伴侣功能。 结果20ug/ml阿司匹林组αA晶状体蛋白的分子伴侣活性为28.12%±0.13;200ug/ml阿司匹林组为36.5%±0.16;2mg/ml阿司匹林组为34.1%±0.18。经统计分析,三组之间不全相同,其中不添加组(25.9%±0.11)和20ug/ml阿司匹林组(28.12%±0.13)之间无统计差异,P>0.05。不添加组(25.9%±0.11)和200ug/ml阿司匹林组(36.5%±0.16)之间比较,P<0.001.不添加组(25.9%±0.11)和2mg/ml阿司匹林组(34.1%±0.18)之间比较,P<0.001。 结论阿司匹林能抑制萘性白内障中αA晶状体蛋白的分子伴侣保护作用的下降,且该抑制作用随阿司匹林浓度升高而升高。……   
[关键词]:αA晶状体蛋白;分子伴侣;阿司匹林
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:复旦大学2009年