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抗ICAM-1单链抗体的制备及其生物学活性研究

孙红

   炎症是机体的一种重要的基本病理过程。各种炎症虽然有其特殊性,但从局部的病理变化看来,它们有着不少共同点,即都是机体对致炎因子的损伤作用所产生的一种反应,最新的医学研究发现,当炎症的程度严重或发展成慢性炎症时,它可能导致肿瘤、心血管疾病、糖尿病、自身免疫性疾病以及与年龄相关的疾病(如关节炎、早老性痴呆病、骨质疏松症等)的发生。细胞间粘附分子-1(ICAM-1)作为重要的致炎因子,在炎症反应、免疫监督等过程中起着重要的作用。以上许多疾病过程中可见ICAM-1的异常表达,因此阻遏ICAM-1的表达为以上疾病的诊断和治疗提供了新的策略。 本研究在已制备的抗ICAM-1单克隆抗体的基础上,从分泌该单抗的杂交瘤细胞株中克隆出VH和VL基因,组装成ScFv基因,将ScFv基因插入原核表达载体pET-22b(+)中,转化宿主菌中进行表达,之后对表达的包涵体进行了复性和纯化。最后通过体外细胞实验和体内动物实验检测ScFv抗体的生物学活性。细胞实验表明,制备的ScFv能有效地抑制内皮细胞与单核细胞之间的粘附;动物实验证明此ScFv对小鼠无菌性炎症有明显的抑制作用。本课题为进一步治疗炎症性疾病奠定了基础。……   
[关键词]:ICAM-1;单链抗体;纯化;复性;生物学活性
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:吉林大学2008年