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蝴蝶兰组织培养技术体系研究

王立娅

   本试验研究目的在于探索蝴蝶兰离体快繁的有效途径,采用带腋芽的花梗段来诱导丛生芽,继而进行增殖培养,最后诱导生根,炼苗移栽。试验以单因素和正交设计为主,对结果作方差分析及多重比较,确定了蝴蝶兰组织培养的一系列技术支持,研究结果表明: 1.蝴蝶兰离体培养适宜的外植体为已开花的花梗中部腋芽。经过预处理的外植体用0.1%氯化汞处理13min能达到很好的效果。初代培养腋芽萌发适宜的激素配比为6-BA 10mg/L+NAA 0.25mg/L。 2.改良KC培养基是最适合蝴蝶兰增殖生长的培养基,其次为1/2 MS培养基。NAA和6-BA是蝴蝶兰增殖生长最适宜的生长素和细胞分裂素,二者的最佳配比为6-BA 7mg/L+NAA 0.5mg/L。蝴蝶兰在pH 5.4~6的微酸性条件下增殖效果最好。 3.不同的添加物均有促进蝴蝶兰增殖的作用,叶片匀浆的效果最好,以5.5g/L的用量效果最佳。琼脂的用量在5.5g/L时最适合蝴蝶兰的增殖生长。活性炭能有效防止褐化和促进生长,综合效果最佳。除外植体4℃冷藏24h处理外,其余处理措施均可减轻组织褐化,但效果均不及活性炭。 4.继代培养时,为得到整齐一致,生长健壮的试管苗,应考虑到芽苗的大小,1cm长的为最佳试材。蔗糖能显著促进蝴蝶兰增殖生长,且适宜浓度为30g/L。在蝴蝶兰大规模工厂化组培生产中,可以用优质白砂糖代替蔗糖作为增殖生长的碳源。可用自来水代替蒸馏水以降低成本。 5.1/2改良KC培养基是最适合蝴蝶兰生根的培养基。IBA是蝴蝶兰生根适宜的生长素,最佳浓度为1mg/L。有机添加物香蕉泥、椰汁和活性炭均能促进生根,它们的最佳配比为香蕉泥70g/L+椰汁140mL/L+活性炭2g/L。根匀浆有利于根伸长生长,以5g/L和15g/L效果较好。但加入根匀浆后,根条数减少。培养基中加入适量的蔗糖有利于根快速而健壮的生长,最佳用量为10g/L。炼苗天数以7~10d为宜,蝴蝶兰移栽基质以疏松、透气的水苔效果最好。……   
[关键词]:蝴蝶兰;组织培养;丛生芽;继代培养;生根培养
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:河北农业大学2008年