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马勃多糖的分离纯化与基本结构研究

武翠玲

   本文以药用植物马勃为研究对象,研究其多糖的提取、分离纯化、结构以及理化性质,为揭示马勃多糖的结构与活性的关系,进一步开发利用此类资源初步奠定了基础。主要研究内容与结论如下:马勃经热水浸提,用Sevage法脱蛋白,乙醇沉淀,得到马勃粗多糖。粗多糖经DEAE-sepharose fast flow离子交换层析和Sephacryl S-300 HR凝胶层析进一步纯化得到三个主要多糖组分:CGPⅠ-1,CGP-Ⅱ,CGP-Ⅲ。三种多糖分别经Sephacryl S-300 HR凝胶层析检测显示单一对称峰,琼脂糖电泳呈现单一斑点,紫外260nm,280nm扫描没有吸收峰,证明三种多糖为不含蛋白、核酸的均一组分。通过Sephacryl S-300 HR凝胶层析测定CGPⅠ-1,CGP-Ⅱ,CGP-Ⅲ的表观分子质量分别为9.12×10~4Dal,18.6×10~4Dal,15.6×10~4Dal;纸层析和GC-MS分析三种多糖中的单糖组成和摩尔比,研究发现CGPⅠ-1含有甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其摩尔比为1.22∶11.28∶3.92;CGP-Ⅱ含有甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其摩尔比为1.74∶26.45∶0.36,CGP-Ⅲ含有甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其摩尔比1.06∶9.9∶3.29。~(13)CNMR图谱和咔唑-硫酸法研究均表明CGP-Ⅱ,CGP-Ⅲ中含有糖醛酸,用咔唑-硫酸法测得CGP-Ⅱ,CGP-Ⅲ中的糖醛酸含量分别为17.2%和20.5%。三种多糖的紫外光谱显示,它们的最大紫外吸收峰具有随糖浓度的降低向低波长漂移的现象。红外光谱显示,在1420 cm~(-1),2920 cm~(-1),3400 cm~(-1)左右均具有多糖的特征吸收峰。三种多糖均为吡喃糖,通过对核磁共振图谱的解析进一步证实的CGPⅠ-1为多不含糖醛酸的中性多糖,同时具有α、β两种键型。而CGP-Ⅱ,CGP-Ⅲ则以β型差向异构为主,由高碘酸氧化和Smith降解得知CGPⅠ-1中存在大量的1→6、1→键型,且与1→4/1→4,6键的摩尔比为7.8∶5.5,CGP-Ⅱ中1→6,1→,和1→4/1→4,6键,摩尔比为7.4∶7.9。CGP-Ⅲ中其摩尔比为8.4∶9.3。三种多糖主链中都存在不被高碘酸氧化的Glc(1→3)键型。通过原子力显微镜对CGPⅠ-1的分子形貌观察,发现其为高度分支结构,高浓度时易形成强大的网络结构。……   
[关键词]:马勃;生物活性多糖;药用植物
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:四川大学2007年