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不同光照条件下褪黑素对鸭免疫机能的影响

龄南

   本试验分3组(短光照组6h、对照组12h和长光照组18h )饲养幼鸭45只,通过控制光照时间来改变鸭体内褪黑素的水平,利用经典血细胞计数法、流式细胞术、放射免疫测定法、酶联免疫分析法、分子克隆和原位杂交技术对外周血细胞、细胞因子、免疫球蛋白、淋巴细胞及其亚群的变化和褪黑素3型受体亚型在鸭免疫器官中mRNA的表达及分布规律进行了研究,从而阐明不同光照条件下内源性褪黑素对鸭免疫功能的影响。结果如下: 随着光照时间的缩短,内源性褪黑素水平的升高,鸭外周血中的白细胞数(P< 0.01)、红细胞数(P< 0.01)、血红蛋白含量(P< 0.01)、IL-2 (P< 0.05)、IL-6 ( P > 0.05)、TNF-α(P>0.05)、γ-IFN ( P<0.01)、IgG(P<0.01)、CD3+CD4+(P<0.01)、CD3+CD8+ (P<0.01)T细胞和Bu-1a+ B细胞(P<0.01)的数量均增加;随着光照时间的延长,内源性褪黑素水平的降低,鸭外周血中的白细胞数(P<0.01)、红细胞数(P< 0.01)、血红蛋白含量(P<0.05)、IL -2 (P < 0.05)、IL -6 (P > 0.05)、TNF -α(P > 0.05)、γ-IFN(P<0.01)、IgG (P<0.05)、CD3+CD4+ ( P<0.01)、CD3+CD8+ (P< 0.01)和Bu-1a+ B细胞(P<0.01)的数量均减少。 根据GenBank登载的鸡褪黑素3型受体亚型的mRNA序列设计3对引物,采用RT-PCR技术首次从鸭脑组织中克隆出褪黑素3型受体亚型的部分cDNA片段,长度分别为603bp、468bp和504bp ,应用DNAstar分析软件进行序列分析,结果显示:鸭3型褪黑素受体亚型核苷酸序列与鸡的对应序列同源性较高,分别为:93.5 %、95.9%和95.0%。 采用地高辛分别标记褪黑素3型受体亚型制成cDNA探针,采用原位杂交法检测Mel1a、Mel1b、Mel1c受体基因mRNA在鸭脾脏、胸腺和腔上囊中的表达。结果显示:以上3种褪黑素受体亚型mRNA在鸭的脾脏、胸腺和腔上囊中均有表达,阳性信号密集分布于上述器官中存在有T、B淋巴细胞的胞核和胞浆内;分别对脾脏、胸腺和腔上囊中褪黑素受体的分布情况进行比较发现,同型褪黑素受体之间按时间组比:阳性信号强弱为18h>12h>6h ;同一时间组的不同褪黑素受体亚型之间进行比较:阳性信号强弱为:Mel1a>Mel1c >Mel1b。……   
[关键词]:;褪黑素;褪黑素受体;免疫器官;原位杂交
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:内蒙古农业大学2007年