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四种果仁活性成分的研究

张岩

   杏仁、榛子、山核桃、松籽在分类上属于坚果中的树坚果,在我国种植面积广、产量高、也是在国际上享有盛誉的果仁品种。杏仁、榛子、山核桃、松籽的营养价值高,生理、药理活性明确,经济价值高,随着我国经济树种的开发,树坚果的种植面积还将大幅度提高。因此深入研究它们的活性成分具有重要意义。 目前对果仁的研究比较集中于果仁油脂这方面。本实验采用目前应用较广的冷浸法、超声清洗法、超临界流体萃取法提取果仁油脂并进行了比较研究。结果显示,三种方法对果仁油脂的提取率由高到低依次为:超临界流体萃取法>超声清洗法>冷浸法。四种果仁含油率的高低依次为:松籽>山核桃>杏仁>榛子。另外,用正交分析法优化了超声清洗法提取果仁油脂的工艺。在选定的因素中,最活跃的影响因素是溶剂,其次是料液比,最小的影响因素是时间。最后确定松籽的最佳提取工艺为:以石油醚为溶剂,料液比1:10,超声提取时间为40min;杏仁:以石油醚为溶剂,料液比1:8,超声提取时间为30min;山核桃:以正己烷为溶剂,料液比1:10,超声提取时间为40min;榛子:以正己烷为溶剂,料液比1:10,超声提取时间为30min。应用GC/MS对四种果仁油脂的脂肪酸组成进行了分析,结果表明:四种果仁的脂肪酸组成有很大差异,但是均含有9-十八碳烯酸甲酯和9,12-十八碳二烯酸甲酯,且含量都很高。 杏仁肽是杏仁蛋白质经酶水解、精制后所得到的短肽混合物。本研究以脱脂杏仁为原料,经蛋白质提取、酶解、分离等过程制备有生物活性的杏仁蛋白质多肽。杏仁经搅拌、调pH值、离心等一系列过程,分离出杏仁蛋白质。分别用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶对其进行水解,以水解度为指标,确定木瓜蛋白酶为最佳酶制剂。通过单因素试验和正交试验确定了木瓜蛋白酶的最佳水解条件:pH值为11.3,底物浓度为30mg/mL,酶与底物比为6.5%,温度60℃,水解时间2h,可以得到水解度为65%的杏仁肽。本实验采用凝胶色谱法分离多肽,凝胶型号为SephadexG-25,洗脱液为pH值8.5的Tris-HCl,洗脱速度为2ml/4min,收集各管洗脱液,加入靠马斯亮蓝G-250,在595nm下检测各管吸光度,作洗脱曲线。根据测得内水体积、外水体积,排除大分子量的洗脱峰和分子量约为单个氨基酸的洗脱峰,则中间部分为分子量为5000左右的多肽混合物。此多肽混合物再经过浓缩、干燥即成为成品。 应用凯氏定氮法测定果仁中的蛋白质含量,结果为:山核桃>杏仁>松籽>榛子;蒽酮比色法测定果仁中可溶性总糖含量,结果为:杏仁>山核桃>松籽>榛子;DNFB柱前衍生化RP-HPLC法测定果仁中氨基酸,测得果仁中含有丰富的氨基酸,其种类至少有16种,且必需和半必需氨基酸的含量很高;用电感耦合等离子体发射光谱仪及火焰原子吸收法对果仁中的Sr、Ti、Mn、Mo、V、Zn、Cr、Fe、Co、Cu、Ni、Al、B、Ca、Mg、Ba、Be、Cd、La、P、Pb、Y、K、Na等24种微量元素进行了检测;用索氏提取法提取苦杏仁苷并采用二次重结晶的方法提纯苦杏仁苷,苦杏仁苷含量为3.13%;用水蒸气蒸馏法提取杏仁精油,精油得率1.85%,经GC/MS分析,共分离出21种化合物,鉴定出了其中的18种,其中14种为首次从杏仁中获得,鉴定出的成分占精油总成分的99.99%,明显高于前人。……   
[关键词]:松籽;杏仁;山核桃;榛子;活性成分
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:吉林农业大学2007年