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土茯苓抑制酪氨酸酶活性成分研究

秦汝兰

   本文以从土茯苓中寻找对酪氨酸酶有抑制活性的天然化合物及研究土茯苓抗氧化作用为主要目的,对其化学成分进行分析,从土茯苓中提取分离出五个单体化合物;同时采用RP-HPLC法对土茯苓中白藜芦醇的含量进行了测定;并利用DPPH·法测定土茯苓的抗氧化活性及紫外分光光度法对土茯苓提取液总黄酮含量进行测定。 近年来,对土茯苓化学成分及其药理作用的研究报道较多,但研究土茯苓中对酪氨酸酶有抑制活性的化合物及其抗氧化作用的报道未见。本文比较了土茯苓与其他中药对酪氨酸酶的抑制活性,结果表明土茯苓对酪氨酸酶具有较强的抑制活性。 本研究采用土茯苓饮片为原料,用60%乙醇浸泡,超声提取,通过硅胶柱层析,氯仿甲醇梯度洗脱及ODS柱层析及结合RP-HPLC分析技术从土茯苓中分离得到五个单体化合物,通过理化性质及波谱解析,确定它们的化学结构为槲皮素、落新妇苷、土茯苓苷、白藜芦醇、5-O-咖啡酰莽草酸。此方法简便,洗脱剂可反复回收利用。对分离得到的5个单体化合物进行酪氨酸酶活性测定,单体活性没有总提取液活性高,推测土茯苓乙醇提取物的酪氨酸酶抑制活性可能是各化合物之间的协同作用,或者是乙醇提取物中尚存在有更强的活性物质。 白藜芦醇具有抗氧化、抗自由基及影响花生四烯酸代谢的药理作用,本实验建立了土茯苓中白藜芦醇含量的RP-HPLC测定方法,并对不同产地土茯苓中自藜芦醇含量进行比较,其中湖南湘潭白藜芦醇含量最高。 采用DPPH·法测定不同产地土茯苓总提取物的抗氧化活性,实验结果表明广东韶关土茯苓总提取物抗氧化活性最强,但总提取物的抗氧化活性与白藜芦醇的含量没有呈正相关系,因此我们提出土茯苓的抗氧化活性可能是各成分之间的共同作用。 利用紫外分光光度法对多个产地的土茯苓甲醇总提取液中总黄酮含量进行测定,发现土茯苓中总黄酮含量受地域及气候关系影响较大。 ●考察了土茯苓总提取物及单体化合物的酪氨酸酶抑制活性 ●建立了土茯苓中白藜芦醇的高效液相检测方法 ●利用DPPH·法测定土茯苓的抗氧化活性……   
[关键词]:土茯苓;酪氨酸酶;抑制活性;抗氧化;定量
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:吉林农业大学2007年