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紫萼玉簪组织培养及离体再生体系的建立

王春婷

   本研究为探索紫萼玉簪[Hosm ventricosa(Salisb.)Stearn]组织培养快速繁殖的有效途径,以紫萼玉簪的根状茎上的腋芽、花序、胚芽和试管苗叶片为外植体材料,对紫萼玉簪的组织培养以及植株再生进行了系统研究,研究主要结果如下: 外植体取材季节从春季到秋季,启动率有所下降,污染率先增高后降低。外植体达到最高启动率的时间不同:腋芽和叶片在3月,花葶和幼花在5月初,胚芽不受时间限制。外植体的污染率均在8月达到最高值。 在灭菌时间试验中,最宜时间为:腋芽5 min,花葶和种子8 min,幼花和叶片3 min。 在初代培养时,最佳腋芽启动的培养基为MS+6-BA 1.0 mg╱L+NAA0.1 mg/L,启动率为68.6%;有利于诱导紫萼玉簪幼花启动的培养基为:MS+6-BA 0.5mg╱L+NAA0.1 mg╱L,启动率为84.9%;其适宜的诱导培养基是:MS+6-BA4.0mg/L+NAA0.05 mg╱L,启动率为48.1%;胚芽和叶片愈伤组织诱导:其适宜的诱导培养基是MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA0.1 mg╱L+2,4-D 0.2 mg╱L,诱导率达58.2%。 增殖与分化培养:腋芽增殖配方为MS+6-BA 0.5 m╱L+NAA 0.5 mg╱L,30 d后最高增殖倍数达7.35;有利于紫萼玉簪愈伤组织增殖的培养基配方组合为:MS+6-BA 4.0mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg╱L,增殖率达87.4%。适宜的诱导愈伤组织分化的培养基是MS+6-BA 1.0mg╱L+NAA 0.5mg/L,再生率可达83.0%。 生根培养:再生植株在1/2MS+NAA 0.1 m╱L+2,4-D 0.05 mg╱L+AC 0.5%的培养基上生根最好,生根率可达83%。炼苗与移栽,在珍珠岩、蛭石、河沙的配比为1:2:1的基质中的移栽成活率最高,为86.7%。 在紫萼玉簪组织培养试验中发现,用花序作外植体建立再生体系时,所经愈伤组织阶段很短。通过BA与NAA不同比例的对比、以及光照下和黑暗中对照培养,发现以幼花作外植体,于黑暗中培养,可诱导出最高比例的愈伤组织;愈伤组织在黑暗中进行诱导时,可得到最高比例的不定芽。延长暗培养时间,玉簪试管苗会长出带芽茎节,对玉簪属植物进行脱毒培养或种质保存很有意义。 针对试管苗增殖中出现生长势减弱的现象,研究发现KH_2PO_4和水解乳蛋白的存在、低浓度的BA可大大降低腋芽的变异维持生长势,同时可提高腋芽的分化率。……   
[关键词]:紫萼玉簪;腋芽;花序;胚芽;叶片;组织培养;植株再生
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:四川农业大学2007年