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磺胺甲噁唑人工模拟抗体的制备及其应用研究

张远

   人工模拟抗体就是利用分子印迹技术制备的对目标分子具有特异性识别能力的分子识别材料(也称分子印迹聚合体)。人工模拟抗体制备简单,能在恶劣的环境下保持活性,性质稳定,成本低廉,与生物抗体相比具有显著的优势。特别是作为各种快速检测方法中的分子识别元件,在药物及其残留的快速检测方面具有广阔的前景。本文利用分子印迹技术,以本体聚合法和沉淀聚合法分别制备了磺胺甲噁唑人工模拟抗体,并对其等温吸附、静态吸附性能和选择性能等特性以及初步应用进行了研究。 实验结果表明: 1.以磺胺甲噁唑为模板分子,分别以4-乙烯基吡啶、丙稀酰胺、甲基丙烯酸、4-乙烯基吡啶+丙稀酰胺为功能单体,以二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂,偶氮二异丁腈为引发剂,采用本体聚合法制备了一系列的磺胺甲噁唑人工模拟抗体。除功能单体和模板分子外的其他试剂最佳用量分别为15mL乙腈、20mmol二甲基丙烯酸乙二醇酯、40mg偶氮二异丁腈。 2.以磺胺甲噁唑为模板分子,以4-乙烯基吡啶+丙稀酰胺为双功能单体,以二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂,偶氮二异丁腈为引发剂,采用沉淀聚合法制备了磺胺甲噁唑人工模拟抗体P-1和空白对照人工模拟抗体P-2。除功能单体和模板分子外的其他试剂最佳用量分别为100mL乙腈、20mmol二甲基丙烯酸乙二醇酯、20mg偶氮二异丁腈。 3.以4-乙烯基吡啶+丙稀酰胺为双功能单体通过本体聚合法制备的人工模拟抗体P1的识别性能优于以4-乙烯基吡啶、丙稀酰胺和甲基丙烯酸为单功能单体制备的人工模拟抗体,对磺胺甲噁唑有高的亲和性和选择性,吸附量Q为24.4g mol/g,静态分配系数K_D可达24.5mL/g,对磺胺二甲基嘧啶的分离因子α可达2.95,对克伦特罗的分离因子α可达3.89;通过沉淀聚合法制备的磺胺甲噁唑人工模拟抗体P-1表现出对底物磺胺甲噁唑较高的选择性,静态分配系数K_D可达24.8mL/g。 4.掺杂有人工模拟抗体的敏感膜传感器检测电极E1表现出对磺胺甲噁唑较强的特异识别性,且响应快速、灵敏度较高。其中在差分脉冲法实验中,可以看出掺杂有磺胺甲噁唑人工模拟抗体的敏感膜传感器检测电极E1对目标分子磺胺甲噁唑的加入有良好的响应,峰电流值明显下降,加入磺胺甲噁唑前峰电流值为7.9μA,加入2×10~(-4)mol/L磺胺甲噁唑溶液响应后,峰电流值下降为4.13μA,而控制传感器电极E3对加入磺胺甲噁唑分子前后无明显电化学响应。……   
[关键词]:人工模拟抗体;沉淀聚合;分子印迹技术;磺胺甲噁唑;循环伏安法;差分脉冲伏安法
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:浙江工商大学2007年