手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

免疫球蛋白A等的免疫共振散射光谱分析

王娜

   第一部分:绪论 综述了近年来共振散射技术在分析化学和液相金纳米微粒研究中的应用;介绍了金纳米微粒的制备、金标记在免疫分析中的应用以及免疫球蛋白A与转铁蛋白的分析进展。引用文献212篇。 第二部分:IgA免疫复合物微粒的共振散射光谱研究及其分析应用 在pH6.2的Na2HPO4-柠檬酸缓冲溶液中,及聚乙二醇4000存在下,免疫球蛋白A(IgA)与羊抗人免疫球蛋白A血清发生特异性结合,形成了粒径约为1100nm的抗原-抗体免疫复合物微粒;它在340nm,390nm,420nm,450nm,470nm,520nm附近有6个共振散射峰。考察了pH值、不同分子量聚乙二醇、羊抗人IgA血清用量、温度及反应时间对共振散射光谱测定IgA的影响。在选定条件下,IgA浓度在0.133-4.67μg? mL-1范围内均与340nm和470nm处的共振散射强度呈线性关系,其回归方程分别为ΔI340 nm =18.61CIgA+3.19、ΔI470nm=18.57CIgA+6.51,检出限分别为0.068μg?mL-1、0.072μg?mL-1。该法已用于人血清中IgA的测定,并与免疫比浊法测定结果作线性回归分析,其斜率、截距和相关系数分别为1.064、-0.213和0.9299,结果满意。 第三部分:金标记免疫共振散射光谱法检测痕量免疫球蛋白A 采用柠檬酸三钠改良法制备了粒径约为10.0nm的纳米金,并用于标记羊抗人免疫球蛋白A。在pH 5.6的Na2HPO4- C6H8O7缓冲溶液和PEG存在下,金标羊抗人免疫球蛋白A与免疫球蛋白A(IgA)产生特异性结合生成免疫金复合物,导致580nm处金纳米粒子的共振散射峰增强。免疫球蛋白A浓度在0.0054-1.35μg·mL-1范围内与580nm处的共振散射强度成线性关系,方法的检出限为4.18ng·mL-1,用于定量分析人血清中的免疫球蛋白A,结果满意。 第四部分:免疫共振散射光谱分析法测定转铁蛋白 在pH 5.0的Na2HPO4-柠檬酸缓冲溶液及聚乙二醇6000存在下,羊抗人转铁蛋白与相应的抗原转铁蛋白发生特异性结合,生成抗体抗原免疫复合物,导致体系在340nm与470nm处的共振散射峰增强,当转铁蛋白(Tf)浓度在0.10-2.50μg/mL范围内,随着转铁蛋白浓度的增加,340nm和470nm处的共振散射强度线性增强,其检出限分别为0.049μg/mL、0.042μg/mL,用于定量分析人血清中的转铁蛋白,结果满意。 第五部分:免疫球蛋白M的共振散射光谱分析法 在聚乙二醇存在下IgM与IgM抗体在pH5.0的柠檬酸-Na2HPO4缓冲溶液中特异性反应生成免疫抗体抗原复合物,导致体系在340nm处的共振散射峰增强,建立了一个新的测定IgM的免疫共振散射光谱法。IgM的浓度在0.15-9.33μg/mL的范围内,与340nm处的共振散射强度呈线性关系。该方法具有试样用量少、简单快速的特点,用于定量分析人血清中的免疫球蛋白M,结果较为满意。……   
[关键词]:免疫球蛋白A;转铁蛋白;共振散射;金标记;免振共振散射光谱分析
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:广西师范大学2007年