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宣木瓜组织培养及其影响因子的研究

叶建伟

   本论文以宣木瓜的种子为材料,进行了组织培养和耐盐性两个方面的实验。 1.组织培养方面的主要结论如下: 1.1不定芽快速繁殖、诱导生根: 与KT和TDZ相比,BA对不定芽增殖具有更好的效果。NAA与IBA两种生长调节物质对不定芽增殖的影响没有明显的差异。木瓜不定芽在BA0.5 mg/l +NAA0.2 mg/l培养基中,增殖系数最高。降低MS大量元素对不定芽增殖具有负作用。在1/2MS+IBA0.2组合中,不定芽的根诱导率较高、根较长。 1.2愈伤组织的诱导和继代培养: 1.2.1愈伤组织的诱导 ①在子叶诱导实验中,2,4-D能比NAA更高效的诱导出愈伤组织,愈伤生长量大,而且经过继代培养后仍能保持较好的长势。2,4-D与KT组合的效果好于2,4-D与BA的组合。筛选试验表明:MS+2,4-D1mg/l+KT0.1mg/l对子叶愈伤诱导及其生长效果较好。②胚轴愈伤组织诱导率达到87%,而子叶较低为69%。虽然NAA诱导的效果较好,但愈伤组织生长速度较慢;而2,4-D则能高效地诱导出愈伤,但所诱导的愈伤容易出现玻璃化现象。提高NAA,2,4-D和BA的浓度,愈伤呈现水浸状的比例和程度都会相应的提高。所设计的组合中,2,4-D 0.1mg/l+BA 0.3 mg/l对胚轴愈伤的诱导效果较好。③暗培养能提高愈伤组织的生长量.随着黑暗培养时间的延长,愈伤组织松散程度也不断上升,子叶颜色由浓绿色逐步向淡黄色过渡。 1.2.2愈伤组织的继代培养 ①在固体培养基中,子叶愈伤组织继代培养可以根据目的不同选取不同的继代培养基。长期继代培养,将愈伤组织继代培养在NAA1.0mg/l+KT0.5mg/l的培养基或NAA0.5 mg/l与TDZ 2mg/l的组合中,可得到较好的效果。如需短期内获得较多的愈伤组织,可将愈伤组织在2,4-D1.0mg/l+KT0.1mg/l中培养。②子叶愈伤在液体培养条件下,生长量较低,效果较差。③胚轴愈伤在NAA1mg/l+KT 0.3mg/l培养基中的生长量最大。④维生素C对愈伤组织降低褐化的作用较小,但能促进愈伤组织变绿。 1.3不定芽的诱导发生: 子叶诱导不定芽的培养基中需要添加一定量的TDZ和NAA。不定芽有玻璃化现象,在TDZ 0.5 mg/l + NAA 1.0mg/l的培养基中得到的不定芽发育较好。 2.不同NaCl浓度对种子和愈伤组织的生长的影响,主要结论如下: 2.1愈伤组织:当NaCl浓度较低时,愈伤组织的生长量未受到较大影响、MDA含量较低,POD、SOD活性提高,细胞内可溶性糖、脯氨酸含量升高。而在高浓度NaCl的胁迫下,愈伤组织的生长具有明显的抑制作用、MDA含量升高,而POD、SOD活性开始降低、可溶性糖含量也降低,但是脯氨酸含量一直升高。 2.2幼苗 随着NaCl浓度的升高,种子的萌发率和幼苗根系活力呈递减趋势;除了在0.5‰NaCl处理的幼苗中,其叶绿素含量高于对照,其余处理均低于对照;幼苗的SOD、POD活性变化趋势较一致,先升高后降低,在1‰NaCl浓度具有最好的活性。MDA含量随NaCl处理浓度的升高而升高。……   
[关键词]:宣木瓜;愈伤组织;盐胁迫;不定芽
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:南京林业大学2007年