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中国苍耳遗传结构的ISSR分析与茶树体胚发生研究

周山勇

   本研究以我国15个省的16个野生苍耳居群(含2个种和1个变种,即苍耳、蒙古苍耳和近无刺苍耳)为材料,利用ISSR分子标记进行遗传结构分析;同时,还以茶树“铁观音”品种幼胚为材料,对茶树幼胚的直接体胚发生体系进行初步的研究,并对体胚的发生过程进行形态学和解剖学观察。主要研究结果如下: 1.苍耳居群遗传结构的ISSR分析 根据苍耳的特点,建立了苍耳ISSR-PCR反应体系。对16个居群的遗传结构ISSR分析,大致揭示了中国地区分布的野生苍耳遗传多样性。多样性分析结果表明:全部样本Shannon多样性指数(I)平均值为0.0738,群体间的Shannon多样性指数(I)为0.35;以居群广西桂林的Shannon多样性指数(I)为最高(0.2033);基于基因频率矩阵,利用平均观察等位基因数(A),平均有效等位基因数(Ae)和Nei基因多样性指数(H)对16个野生苍耳居群内遗传多样性进行评价,平均观察等位基因数(A)与多态位点百分率(P)对16个野生苍耳居群遗传多样性评价结果是一致的;从整体上看,16个苍耳属野生资源的居群间遗传多样性与经纬度不存在相关性,但大连(pop13)和海南(pop15)两个居群的遗传多样性最低,应该是与海岛隔离有关。Genetic diversity(G_(ST)群体间杂和系数)68.41%的变异基于居群间,而仅31.59%的变异存在于居群内,群体间保持较高水平的分化。AMOVA分析结果进一步表明了类似的情况,表明居群间具有一定水平的遗传分化。并利用NTSYS-pc2.1软件对16个野生苍耳居群进行了聚类分析。同时研究了苍耳属植物居群的遗传结构与其品质的关系,系统地论述了苍耳属植物居群的形态学变异、遗传变异、化学成分变异的关系。为中药苍耳属植物居群的品质评价和资源利用提供了借鉴。 2.茶树体胚发生研究 以乌龙茶树主栽品种“铁观音”为材料,建立了茶树幼胚的愈伤组织诱导体系,以P7配方(0.05mg/L2,4-D+3mg/LBA)的愈伤诱导率最高;建立了茶树的直接体胚发生体系,并对其进行了优化,认为以改良的MS培养基,附加0.2mg/LIBA、2mg/LBA和500mg/L的L-谷氨酰胺的配方最好,体胚的诱导率最高;体胚可以在原来的培养基上增殖;体胚的成熟培养以EDM5的效果最好。茶树体胚发生过程进行的形态学观察表明,形态多样的体胚进行了分类,分为正常胚、不定形胚(畸形胚)、连体胚、花状多子叶胚和愈伤化胚,正常胚和某些畸形胚可以萌发利用。体胚的发生过程的解剖学研究表明,茶树的体胚及次生体胚主要起源是表皮的内皮层,由多细胞或单细胞起源。该研究为茶树的优良基因型快繁和遗传转化提供重要技术基础。……   
[关键词]:苍耳;遗传结构;ISSR;茶树;体胚发生
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:福建农林大学2007年