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载DNA疫苗壳聚糖纳米胶囊的研究

战经润

   本文选用从甲壳类动物中提取的天然无毒、可生物降解、具有良好生物相容性的带正电荷高分子材料—壳聚糖作为载体,制备了载DNA疫苗的壳聚糖-DNA疫苗纳米粒。系统地研究了壳聚糖分子量,N/P,pH值,制备方法等因素对壳聚糖-DNA疫苗纳米粒的形态、包埋率、载药率、基因药物在模拟体内环境下的释放的影响。以优化壳聚糖-DNA疫苗纳米粒的制备条件,探讨制备条件与壳聚糖-DNA疫苗纳米粒的性质相关性,进而揭示壳聚糖-DNA疫苗纳米粒作为基因治疗的载体的机理所在。 壳聚糖的结晶性、力学特性、通透性等都和壳聚糖分子量大小相关,而壳聚糖的许多独特功能只有在分子量降低到一定程度时才表现出来。因此,选择适当的方法对壳聚糖进行降解就显得尤为重要。本文选用超声波与H_2O_2氧化降解和微波技术与H_2O_2氧化降解的方法对壳聚糖进行降解以获得纯化的不同分子量的壳聚糖。结果表明:采用降解体系为4%的壳聚糖的5%乙酸溶液,加入最终浓度5%H_2O_2,进行超声波辅助降解80min或微波降解8min可获得较满意的结果。 壳聚糖分子荷正电,DNA疫苗分子荷负电,我们利用这一特点采用复凝聚法制备疫苗壳聚糖纳米粒。以纳米粒的平均粒径与形态作为控制指标,进行单因素实验。从纳米粒的粒径分布、形态、包埋率、载药率、疫苗包埋量和体外释放率等方面考察了纳米粒的基本性质。结果表明:采用复凝聚制备法能够实现壳聚糖对DNA疫苗的包埋,包埋率达到83.46%。制备的壳聚糖DNA疫苗纳米粒呈亚球型,粒径在300~600nm。壳聚糖DNA疫苗纳米粒性质较稳定,能在体外平稳释放100小时以上。而且壳聚糖DNA疫苗纳米粒能够在人工肠液缓慢释放,保护DNA疫苗免受DnaseⅠ的降解。证明壳聚糖DNA疫苗纳米粒作为基因治疗的口服药物制剂的可能性。……   
[关键词]:纳米粒;非病毒载体;壳聚糖;DNA疫苗
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:福建农林大学2007年