手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

鸭疫里默氏杆菌耐药性与耐药基因研究

蔡秀磊

   鸭疫里默氏杆菌( Riemerella anatipestifer,RA)病是一种主要侵害鸭、火鸡和其他鸟类的接触性传染病,该病又称为新鸭病、鸭疫综合征、传染性浆膜炎和鸭疫巴氏杆菌病等。该病主要病理变化是纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎、脑膜炎、干酪样输卵管炎等,发病率高,病死率也高。耐过鸭多成僵鸭,生长迟缓,造成极大的经济损失,是目前危害养鸭业的主要传染病之一。药物治疗作为最主要的防治手段,却常常因为该菌极易产生耐药性而导致治疗失败,带来不必要的经济损失,因此开展对该菌的耐药性及耐药基因方面的研究尤为重要。 本实验自临床分离到22株鸭疫里默氏杆菌,在药敏试验的基础上,利用PCR技术,对该菌的基因盒-整合子系统进行了检测,从分子水平上研究该菌的耐药性产生与传播机制。 本研究自浙江省部分鸭场收集出现典型浆膜炎病变的病死鸭肝脏、心脏,进行细菌的分离、纯化培养、生化鉴定、血清型分型。共分离得到22株RA,其中4株为RA 1型,14株为2型,1株为10型,3株为11型,表明在浙江地区流行的RA还是以2型为主。 本研究采用纸片法对分离菌株进行药敏试验,调查、分析浙江省鸭疫里默氏杆菌的耐药特性。本研究所涉及菌株的药敏试验结果显示,浙江省鸭疫里默氏杆菌临床分离株多重耐药现象十分严重,对卡那霉素、丁胺卡那、青霉素、新霉素的耐药性很高,对红霉素和氯霉素最为敏感,极敏感菌株分别达到了63.6%(14/22)和40.9%,所有菌株对氯霉素都敏感,没有耐药现象。 本研究成功的利用PCR技术,首次对鸭疫里默氏杆菌浙江分离株进行了基因盒-整合子系统的检测。根据Genbank中已发表的I型整合子的I型整合酶基因序列、5’和3’端保守区的序列,利用软件Primerprimer 5.0设计特异性引物并合成,进行PCR扩增。在对扩增产物进行初步酶切鉴定的基础上,克隆、测序。序列分析结果表明,所有供试菌株中都含有I型整合子结构,且I型整合酶基因、5’CS、3’CS与其他细菌中的该结构同源性极高,为同一结构。对整合子可变区进行扩增得到两种大小不同的基因盒,长度分别为1048bp(InI-A)和2352bp(InI-B)。In I-A中含有一个耐药基因盒aadA5基因,编码核苷转移酶,导致细菌对氨基糖甙类药物产生耐药性。InI-B含有长度为555bp的aac6-II基因,编码酰基转移酶,引起细菌对氨基糖甙类药物的耐药;长度为633bp的catB3基因,编码氯霉素乙酰转移酶,介导对氯霉素产生耐药性;长度为792bp的aadA1基因,编码核苷转移酶,介导对氨基糖甙类药物的耐药。……   
[关键词]:鸭疫里默氏杆菌;分离鉴定;耐药性;I型整合子
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:山东农业大学2007年