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氧氟沙星单克隆抗体制备及ELISA方法的建立

于海峰

   本实验将氧氟沙星与牛血清白蛋白用EDC法进行偶联,成功地制备了免疫抗原并免疫BalB/c小鼠。同时利用氧氟沙星与卵清蛋白偶联制备的包被抗原进行筛选,采取杂交瘤建株技术,共获得7株能稳定分泌抗氧氟沙星单克隆抗体的杂交瘤细胞株1E8、2A3、2F10、2H3、3D8、3G7、和4F4。在对所获单克隆抗体的效价、亲和力、特异性等进行了细致分析的基础上,选择了4F4腹水用于建立氧氟沙星的间接竞争ELISA检测方法。利用优化后的实验条件进行间接竞争ELISA检测并建立标准曲线,标准曲线的回归方程为y= -3.1968x + 3.7028,相关系数R2=0.9958,最低检测限1.43ng/mL,线性检测范围1.43~4000ng/mL。分别取鸡的肌肉和肝脏组织添加标准氧氟沙星后进行检测,其平均回收率分别为87.0%和107.87%。……   
[关键词]:氧氟沙星;单克隆抗体;ELISA
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:吉林大学2007年