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丝光绿蝇幼虫分泌物抗菌肽的纯化

孔凡胜

   抗菌肽是一种使生物体免受微生物感染、并与免疫相关的多肽。这些多肽能够抑制细菌感染并且几乎对宿主不产生毒性及过敏反应等副作用。因此,作为潜在的新型安全抗生物或除虫剂,抗菌肽可以被应用于医药和农业领域。本文以丝光绿蝇幼虫为研究对象,试图从幼虫中分离出抗菌肽,为把这些多肽开发成抗菌药物做前期的准备。 本论文从建立丝光绿蝇幼虫活性检测手段入手,研究了影响酶活性的多种因素,确定了纯化的最佳条件,设计出一套可行的实验方案,对丝光绿蝇幼虫分泌物抗菌肽进行了纯化,取得了以下结果: 1.比较了抗菌活性成分检测方法,结果证明浊度法最为灵敏。 2.确认了丝光绿蝇分泌物中抑菌成分为蛋白类物质。本文选择了DEAE-sepharose离子交换层析作为初级纯化手段,优化了DEAE-sepharose梯度洗脱条件。 3.对系列层析方法进行了优化组合。第一步采用DEAE-Sepharose离子交换层析分离,收集活性组分进行第二步Superdex-75凝胶过滤层析分离,同时用电泳检测分离纯化的效果。纯化产物经SDS-PAGE银染显色方法呈单一蛋白质条带。……   
[关键词]:抗菌肽;丝光绿蝇;分泌物
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:大连医科大学2007年