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CpG-ODN对两种病原菌分别诱导的动物乳腺炎乳腺的保护研究

朱于敏

  本文通过采用金黄色葡萄球菌和大肠杆菌分别建立了大鼠的乳腺炎动物模型;并通过免疫调节剂CpG-ODN探索了其对大鼠乳腺局部、整体的防御体系及炎症相关因子的影响,并初步探讨了CpG-ODN的作用机制;并在此基础上将CpG-ODN应用于山羊,进一步印证了其对乳腺健康的有效保护作用及对乳腺炎的预防作用,为乳腺炎的生物防治提供了一条新思路。1 金黄色葡萄球菌和大肠杆菌分别诱导的大鼠实验性乳腺炎模型的建立30只饲喂基础日粮的泌乳初期SD雌性大鼠随机分成五组(n=6),产后72 h分别用灭菌0.01 mol·L~(-1),pH 7.2 PBS(CON组)、低浓度(2×10~5CFU·mL~(-1),SL组)和高浓度(2×10~(12)CFU·mL~(-1),SH组)金黄色葡萄球菌,低浓度(2×10~5CFU·mL~(-1),EL组)和高浓度(2×10~(12)CFU·mL~(-1),EH组)大肠杆菌各100 μL,经乳头管灌注到大鼠第四对乳腺内(双侧),灌注后24 h颈静脉放血处死。取部分乳腺组织进行组织学观察。SL和EL组的乳腺病变不明显,仅见腺泡腔内乳汁分泌量减少,SH组和EH组的乳腺腺泡结构破坏严重,腺泡腔内有脱落的上皮细胞,并有较多的嗜中性粒细胞(Polymorpho-nuclear neutrophils,PMN)浸润。SH和EH组乳腺组织中肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)水平均有显著(P<0.05)升高,血清TNF-α和IL-6水平无显著性变化。SH和EH组乳腺组织N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGase)活性均极显著(P<0.01)升高,血清NAGase活性极显著(P<0.01)下降。SL和EL组的上述指标均无显著性变化。由结果可知2×10~(12)CFU·mL~(-1)的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌分别成功地诱发了大鼠的乳腺炎。2 肌肉注射CpG-ODN对金黄色葡萄球菌诱导的大鼠实验性乳腺炎乳腺的保护作用研究72只泌乳初期SD雌性大鼠随机分成对照组和实验组(n=36),对照组产后0 h于左后腿胫骨前肌内注射100μL0.01mol·L~(-1),pH 7.2 PBS;实验组肌注CpG-ODN 200μg/只,72 h后经乳导管灌注2×10~(12)CFU·mL~(-1)金黄色葡萄球菌各100 μL/侧到第四对乳腺(两侧)内。分别于灌注前(定义为0 h),灌注后8,16,24,48和72 h(n=6)颈静脉放血处死。组织学观察显示乳腺腺泡内PMN浸润高峰出现在感染后24 h,感染初……   
[关键词]:乳腺炎;CpG-ODN;金黄色葡萄球菌;大肠杆菌;模型;山羊
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:南京农业大学2006年