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应用固化酶检测蔬菜中农药残留的速测技术研究

黄永春

  农药残留的快速检测技术对保护广大消费者身体健康、避免急性食物中毒事件的发生,具有重要意义。本文针对以往农药残留快速检测技术中存在的一些问题进行了比较深入的探讨,在此基础上开发出一套农药残留快速检测设备,并应用于实际蔬菜样品的检测。首先,本文对以往大多数农药残留快速检测技术中使用的快速提取方法进行了研究。在以前的方法中主要通过使用磷酸缓冲液或甲醇水溶液对蔬菜样品进行简单的表面漂洗,以实现对农药残留的提取。作者通过向蔬菜表面添加不同浓度的农药标准样品,分别采用磷酸缓冲液和甲醇水溶液进行农药残留的表面提取,并采用气相色谱进行测定,最终确定了表面漂洗法对敌敌畏、甲胺磷、呋喃丹、乐果、抗蚜威、甲基对硫磷6种农药的提取效率。结果表明,表面漂洗法的提取效率受添加完毕后在室温下放置时间长短的影响。当放置2h时,表面漂洗法对6种农药的提取效率可达到80%以上,但是当放置时间延长到4~5h以后,对6种农药的提取效率急剧下降,一般在20%~40%之间。作者经过实验研究,提出一种采用微型组织捣碎机的快速提取方法,使用这种方法可使6种农药的提取效率达到70%以上。其次,本文对乙酰胆碱酯酶的固定化技术进行了研究。采用交联法对酶进行固定是一种广泛采用的固定化方法,本文对影响固化乙酰胆碱酯酶活性的固定化条件,诸如pH值、BSA、GA、明胶的最佳使用浓度进行了实验研究。经交联法固定的乙酰胆碱酯酶,在室温下放置6个月以后酶活性仍可保持60%以上。但是采用交联法对酶进行固定化过程中必须使用双功能试剂戊二醛,此试剂本身会对乙酰胆碱酯酶的活性造成较大伤害,所以经固定化以后酶的活力回收率较低。目前,一种光交联试剂聚乙烯醇苯乙烯吡啶(PVA-SbQ)在酶的固定化过程中倍受青睐,本文在实验室合成出PVA-SbQ。经PVA-SbQ固定后的乙酰胆碱酯酶具有较高的活性回收率,而且在室温下放置6个月后,固化乙酰胆碱酯酶的活性仍可保持初始固化酶活性的70%以上。第三,为了提高对农药残留检测结果判断的准确性,本研究采用酶标仪对检测结果进行读数测量,以代替目视观察结果的方法。酶标仪通常是针对酶联……   
[关键词]:农药残留;快速检测;固定化酶;乙酰胆碱酯酶
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:南开大学2006年