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小鼠骨髓间充质干细胞在体外对淋巴细胞增殖和细胞凋亡的影响

曾婷婷

  背景:骨髓间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)是骨髓基质的祖先细胞,具有多向分化的能力。MSCs同时还具有调节免疫系统的作用。实验证实MSCs可以减少移植物抗宿主病(GVHD)的发生率并减轻其严重程度,能够延长皮肤移植物的存活时间。目前有许多关于MSCs的免疫调节方面的报道,关于MSCs对淋巴细胞抑制效应的研究尤其多,但是MSCs免疫抑制的机制目前并不清楚。研究目的:本文探讨骨髓间充质干细胞对淋巴细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制。实验方法:常规分离培养BALB/c鼠的MSCs细胞,经传代3代后得到形态和免疫表型典型、具有多向分化特性的MSCs细胞,实验前用~(60)Co照射30Gy备用。从BALB/c鼠外周血和脾脏分离单个核细胞,经体外常规纯化后得到反应淋巴细胞,在PHA、IL-2和ConA分别作用下,MSCs和淋巴细胞按1∶4比例进行混合培养。培养72小时后,用MTT法检测淋巴细胞的存活数量,并用流式细胞术检测淋巴细胞表面CD3和Ly-43的表达。细胞凋亡检测采用Hoechest 33258染色、Annexin V流式检测和DNA电泳实验。提取淋巴细胞的mRNA进行凋亡相关基因芯片的检测,获取可能参与凋亡的分子的信息。实时定量PCR检测淋巴细胞……   
[关键词]:骨髓间充质干细胞;淋巴细胞;细胞增殖;细胞凋亡;基因芯片;核因子-κB
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:四川大学2006年