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红景天组织和细胞培养及药用有效成分提取研究

刘海军

   红景天为景天科(Crassulaceae)红景天属(Rhodiola)多年生草本药用植物,在全世界共有90种,主要生长在平均海拔2000米以上的高山地区。我国是红景天的主产区,共有73种、2亚种、7变种。红景天始载于藏医药学著作《四部医典》,已有1000多年的应用历史。传统的红景天主要用于治疗肺炎、咳嗽、跌打损伤、烧烫伤等症,具有清热解毒和燥湿等神奇功效,享有“高原人参”的美誉。近几年研究发现红景天具有抗氧化、抗疲劳、抗微波辐射、抑制肿瘤等作用,是具有发展前途的环境适应性药物。2005版《中华人民共和国药典》正式把红景天从附录中收入到名录中,突出了红景天药用价值的重要性。大规模人工采挖、恶劣的生长环境、自身的花粉败育等因素共同导致了野生红景天植物资源濒临灭绝。本论文是在西藏自治区自然科学基金重点项目(2002-66)资助下,以解决红景天资源短缺问题为出发点,通过近5年时间系统研究了珍稀名贵红景天的组织培养、细胞培养和有效成分提取,主要研究结果如下: 首先,对云南红景天、大花红景天、库叶红景天和长鞭红景天四种珍稀名贵红景天进行了组织培养快繁研究。0.5%有效氯对红景天外植体表面灭菌25~30 min比较合适。培养基中添加1~1.5 ml/L PPM可以有效抑制大花红景天外植体内生真菌滋生问题。采用TDZ、BA和NAA的组合或单独处理进行红景天不定芽的诱导,实验表明:TDZ对云南红景天和大花红景天不定芽诱导具有较强的诱导活性,而对库叶红景天和长鞭红景天效果不显著。90%的云南红景天叶片在添加2.5 mg/L TDZ的培养基上平均可诱导出26个不定芽,在添加0.5 mg/L TDZ和0.5 mg/L NAA组合的培养基上,大花红景天茎外植体不定芽诱导率达到100%,平均每个外植体可获得18个不定芽;库叶红景天叶外植体在添加2.5 mg/L BA和0.5 mg/L NAA的培养基上,不定芽诱导率达80%,平均每个外植体可诱导出4个不定芽。86.1%的长鞭红景天叶外植体在添加3 mg/L BA和0.1 mg/L NAA的MS培养基上不定芽诱导个数平均为5.3个。在建立再生体系的基础上,采用浸没式生物反应器(商品名:RITA)进行长鞭红景天不定芽的生物反应器培养,长鞭红景天不定芽在生物反应器中每升培养基最高可繁殖650个不定芽,与液体悬浮培养(620个/升)相比没有达到显著性差异,但显著高于固体培养(500个/升)和支撑培养(240个/升)。……   
[关键词]:红景天;红景天甙;细胞培养;组织培养;生物反应器;有效成分提取
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:北京林业大学2006年