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小麦成熟胚转化系统的建立与转盐胁迫应答基因植株的获得

吴峰

  本研究以小麦品种R57(川农17)和R59(川农12)的成熟胚愈伤为材料,进行离体培养研究,探讨了保存时间对不同收获时间的种子成熟胚愈伤组织诱导能力的影响。以R57、R59、R25(川农18)以及三个1RS/1BL易位系品系为材料,讨论了黑麦染色体1RS对小麦成熟胚愈伤组织诱导能力和分化能力的影响。同时以小麦品种MY11(绵阳11)、R57、R59、R88(川农19)成熟胚愈伤组织为受体,在无选择压下用基因枪介导法进行了水稻抗盐胁迫应答SAMDC基因的转化,同时对T_1代植株进行了耐盐性鉴定。探讨了愈伤预培养时间、轰击距离、高渗处理对基因转化的影响。以期初步建立起小麦成熟胚基因枪转化体系。1.以保存了两年的小麦新品种R57、R59的种子的成熟胚为外植体进行离体培养。结果显示,与该品种新鲜成熟胚的成愈率相比,经过两年保存的种子的成愈率有明显下降。且同年中,迟收获的种子保存后成其熟胚成愈率比早期收获的种子高。2.对R57、R59、R25以及三个1RS/1BL易位系品系的成熟胚进行离体培养,与对照MY11相比较,含黑麦染色体1RS的品种(品系)的成熟胚的成愈率没有差异,而分化率比对照低且差异显著。3.在基因枪转化过程中,受体材料以预培养15天左右的成熟胚转化效果较好;轰击前5小时和轰击后18小时用0.4M甘露醇处理成熟胚愈伤组织可以明显提高转化率;轰击距离为6cm时可提高转化率。4.选用小麦品种MY11、R59、R57、R88等基因型品种为受体进行基因转化,通过基因枪轰击小麦成熟胚愈伤组织首次将水稻S-腺苷蛋氨酸脱羧酶(SAMDC)基因转入小麦中。在无选择压的条件下,得到843株再生植株,移栽成活786株。通过PCR鉴定,12株呈阳性反应,其中MY11 8株,R59 4株。通过Southern杂交证实,SAMDC基因已经整合进小麦基因组中。两个品种的转化率分别达到0.625%和0.38%。分析MY11小麦品种T_0代植株的表型特征表明:T_0代植株生长矮小、结实率低等表型方面的异常是一种生理原因或栽培环境条件所致,其后代表型具有恢复正常的趋势。转SAMDC基因的小麦植株T_1经初步耐盐试验表明,其耐盐性明显高于对照植株。……   
[关键词]:小麦;成熟胚;组织培养;SAMDC基因;基因枪;转基因植株
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:四川农业大学2006年