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复方五倍子抗菌剂有效成分的提取、分离及药效学研究

黄建军

  本研究的目的是考察复方五倍子抗菌剂对鱼类细菌性败血症的治疗效果,阐明发挥疗效的物质基础,试验包括四个部分。1复方五倍子抗菌剂总有效成分提取条件的优选本试验采用逐步比较及正交试验设计法优选复方五倍子抗菌剂中主要成分没食子酸提取工艺。分别比较了水和乙醇两种溶剂、浸渍法和回流法两种提取方法以及醇解和酸解对没食子酸提取含量的影响,得出酸化乙醇连续回流法提取效果最好。采用正交试验优化了酸化乙醇连续回流提取条件,选用正交表L_9(3~4),考察不同浓度、提取次数、提取时间和溶剂加倍量对没食子酸含量的影响。结果表明,各因素对试验结果的影响顺序为提取时间>提取次数>乙醇浓度>溶剂加倍量,根据方差分析得出最佳提取工艺为A_2B_3C_1D_3:即加pH2的70%乙醇为生药量的8倍(ml/g),浸提3次,每次90min。在此提取条件下没食子酸含量10.47%。2 复方五倍子抗菌剂有效成分分析采用薄层层析对复方五倍子抗菌剂总提取物中的主要成分进行分析,用薄层析硅胶GF254制板,以苯:乙醇:甲酸(7:3:1)为展开剂,用氨熏-三氯化铁显色,日光下观察层析结果。采用薄层层析和柱层析联用的方法,通过干法装硅柱,以苯:乙醇:甲酸(7:3:1)作为洗脱液进行洗脱,分离得到各单体。参照理化性质分析及薄层分析,鉴定出复方五倍子抗菌剂总有效成分包含没食子酸、1,8—二羟基蒽醌、大黄素、芦荟大黄素、黄芩苷、槲皮素和鞣质七大成分。通过紫外分光光度法测定了在此提取条件下没食子酸、蒽醌和黄酮含量分别为10.47%、1.51%和4.2%。3 复方五倍子抗菌剂的体外抑菌和联合用药研究将柱层析分离得到的主要单体成分配制成药液,对温和气单胞菌(Aeromonas sobria)、柱状屈挠杆菌(Flexibacier)、豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)和迟缓爱德华菌(Edwrdsieda torda)四种水产常见致病菌进行抑菌试验,结果表明,复方五倍子抗菌剂中主要成分的抑菌活性顺序为:没食子酸>蒽醌(包含1-8二羟基蒽醌、大黄素、芦荟大黄素)>黄芩苷>槲皮素>鞣质。以温和气单胞菌为菌种,将复方五倍子抗菌剂中主要有效成分两两配对,进行体外联合抑菌……   
[关键词]:复方五倍子抗菌剂;有效成分;没食子酸;提取分离;药效
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:西南大学2006年