手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

雄激素受体结合分析和5α-还原酶活性测定方法的建立及初步临床应用

伍学焱

  为了明确男性性分化异常患者的病因学诊断,指导临床治疗方案的制定,本实验室以体外单层培养的外生殖器皮肤成纤维细胞(GSF)为材料,在优选实验条件的基础上建立了雄激素受体(AR)结合分析和5α-还原酶活性测定方法。对8例正常男性,5例单纯性男性尿道下裂症患者和1例社会性别为女性(核型46,XY,外阴女性表型,血清T/DHT比值约100),临床上初步诊断为男性假两性畸型的5α-还原酶活性缺陷症患者进行了AR的最大结合容量(Bmax)、解离常数(Kd)分析和观察了37℃和42℃温度对AR稳定性的影响以及5α-还原酶活性测定。结果发现:(一)AR结合分析。(1)正常男性的AR在37℃和42℃孵育条件下,Bmax分别为80.32±30.94fmol/mg protein.[(x±s),范围48.24~119.94fmol/mg protein]和82.80±28.91fmol/mg protein(范围42.50~124.36fmol/mg protein);Kd值分别为0.46±0.21nM(范围0.30~0.83nM)和0.54±0.22nM(范围0.30~0.83nM)。两种温度下的Bmax之间和Kd之间不存在明显差异(P>0.05)。(2)单纯性尿道下裂症患者AR在37℃和42℃条件下的Bmax分别为65.83±14.94fmol/mg protein(范围45.07~81.32fmol/mg protein)和70.36±22.45fmol/mg protein(范围43.78~100.72fmol/mg protein);Kd值分别为0.63±0.22nM(范围0.25~0.81nM)和0.61±0.19nM(范围0.32~0.78nM)。两种温度条件下的Bmax之间和Kd值之间以及它们与正常男性之间也均无明显差异(P>0.05)。(3)1例男性假两性畸型患者37℃和42℃条件下的Bmax分别为68.83fmol/mg protein和87.64fmol/mg protein;Kd值分别为0.24nM和0.26nM。Bmax和Kd值均在正常男性范围内。(二)5α-还原酶活性测定。(1)8例正常男性5α-还原酶活性为7.00±9.41pmol/mg protein·h[(x±s),范围1.08~23.21pmol/mg protein·h]。(2)5例单纯性尿道下裂症患者5α-还原酶活性为1.56±0.42pmol/mg protein·h(范围1.13~2.04pmol/mg protein·h)。均在正常对照范围内。(3)1例男性假两性畸型患者5α-还原酶活性为0.39pmol/mg protein·h(三次重复测定值分别为0.34、0.46和0.36pmol/mg protein·h)。低于正常男性及单纯尿道下裂患者的最低值(1.08pmol/mg……   
[关键词]:雄激素;同功酶;大鼠;中国协和医科大学;性甾体;受体结合分析;还原酶;活性测定;临床应用
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:中国协和医科大学1998年