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嗜水气单胞菌毒力基因及基因工程疫苗

朱大玲

   本研究对嗜水气单胞菌的毒力与毒力基因分布的相关性进行了研究。克隆了嗜水气单胞菌菌株A. hydrophila XS91-4-1的气溶素基因(aerA)的全序列。进而原核表达出有活性的重组气溶素蛋白。用该重组蛋白分离血液中的锥虫,对该重组蛋白的应用进行了初步的探讨。为该毒素今后深入的应用研究打下基础;另一方面,分析了气溶素蛋白抗原表位的分布,并对基于该毒素蛋白的基因工程亚单位疫苗和核酸疫苗进行了研究。为今后发展和研制有效的嗜水气单胞菌基因工程亚单位多联疫苗和核酸多联疫苗奠定了基础。 嗜水气单胞菌毒力与毒力基因分布的相关性研究,采用PCR方法对我国九株鱼源嗜水气单胞菌编码气溶素、溶血素、胞外丝氨酸蛋白酶的3种毒力基因进行扩增,分析3种基因在不同菌株间的分布情况,并比较了它们对异育银鲫毒力的差异。结果发现ahpA阴性菌株为无毒株,强毒株呈aerA~+hlyA~+ahpA~+基因型。本研究首次发现ahpA阳性的嗜水气单胞菌皆为毒力菌株,并且发现aerA和ahpA基因与嗜水气单胞菌的毒力存在相关性。 克隆了嗜水气单胞菌菌株A. hydrophila XS91-4-1气溶素基因aerA的基因全序列。比较分析了20株不同来源的气单胞菌属菌株气溶素的氨基酸序列,发现气单胞菌属气溶素分为三大类:嗜水气单胞菌类、豚鼠气单胞菌类和温和气单胞菌类,相似性分别为94-99%、79-83%和66-70%。此外,比较发现所有分析菌株气溶素存在两处非常保守的区域,分别为139-153aa处(SYLAHYLGYAWVGG)和342-352aa处(GFLRWGGNAW),可以通过该保……   
[关键词]:嗜水气单胞菌;毒力基因;PCR检测;气溶素;气溶素基因;锥虫;抗原决定簇分析;重组亚单位疫苗;DNA疫苗
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:中国科学院研究生院(水生生物研究所)2006年