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家蚕卵蛋白质组技术平台的优化及有性与孤雌生殖的比较蛋白质组研究

龙晓辉

  蛋白质组学(Proteomics)是后基因组学的主要内容之一,其近年来发展十分迅速,主要涉及两方面的内容:一是分离和分析细胞与组织样品的全蛋白质,即蛋白质组表达模式的研究:二是通过对不同状态样品蛋白质丰度差异的考察来揭示功能,即蛋白质组功能模式的研究,从而实现阐明生物生理/病理的机理以及寻找靶分子等目的。蛋白质组学虽然问世时间很短,但在生物分子的分析方面得到了极其广泛的应用。目前,国际上众多大型研究机构和药物公司投入大量的人力和物力进行蛋白质组学的应用性研究,已在疾病、癌症和老年性痴呆等临床诊断和治疗方面取得了重要进展,鉴定了一批疾病和肿瘤相关蛋白,为病理的早期诊断、药靶的发现以及疗效判断等提供了重要线索,并有着十分诱人的前景。 本博士学位论文工作是建立和发展了家蚕卵蛋白质组技术平台,优化了家蚕卵蛋白质组二维凝胶电泳(2-DE)图谱,并从而对家蚕的有性和孤雌生殖进行了差异蛋白质组分析和生物信息学的研究。本论文主要内容如下: 第一章主要综述了家蚕蛋白质组学的进展,包括蛋白质组学研究中的关键技术—2-DE、生物质谱(MS)以及生物信息学的进展和现状;概述了家蚕蛋白质组研究进展和有待进行前沿领域研究的内容,提出了本课题工作的研究方向。综述还简要介绍了蛋白质组学其它互补分离技术如两维、多维色谱分离技术、抗体芯片和串联亲和纯化技术等。 第二章涉及的研究工作是家蚕样品的获取。为获得家蚕有性生殖与孤雌生殖卵及蚁蚕样品,本工作采用浸酸处理获得有性生殖样品及Astaurov的温汤处理作为孤雌诱导条件,并在前人研究基础和本实验室现有条件下对家蚕孤雌生殖孵化的一些处理条件做了实验条件摸索。实验结果表明高温激变方法可获取较满意的无性繁殖发育卵和孵殖率;并且高温刺激方法获得的孵化率在一定时间范围内随着卵龄的增加孵化率有所提高。本实验因此获得了足量样品量以用于蛋白质组实验研究目的。……   
[关键词]:家蚕;二维凝胶电泳;质谱;蛋白质组学;上样方式;样品制备方法
[文献类型]:博士论文
[文献出处]:浙江大学2006年