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中华绒螯蟹精子形成过程中核碱性蛋白研究

马丹丹

  精子形成阶段,精子由圆形变为长形,染色质高度浓缩,这个过程中核碱性蛋白对浓缩精子核和保护DNA遗传信息起了重要作用。精子形成过程中核碱性蛋白研究始于鱼类中精蛋白的发现。目前,从无脊椎动物到脊椎动物、原生动物到真核动物分别从细胞化学、生物化学、分子生物学等方面进行了深入研究。发现:不同物种之间核碱性蛋白种类和数量有所不同。氨基酸组成和各个氨基酸所占比例也差异性很大。这与物种本身所处进化地位有密切关系。尤其值得注意的是甲壳动物精子,该类精子是非浓缩核,呈现几乎裸露的状态。这一现象在十足目中是普遍存在的,由此吸引了众多研究学者。对于甲壳动物非浓缩精子核的研究,最早集中于光镜方面。随着电镜技术的发展,对非浓缩精子核的研究进一步深入。重要的淡水养殖珍品——中华绒螯蟹(俗称河蟹),是我国重要的经济甲壳类。对于它的精子形成过程中核碱性蛋白种类、核碱性蛋白替代特征尚无人问津。为了阐明这些问题,对其核碱性蛋白进行了以下研究:1.精巢发育组织学研究:精巢由生精小管组成。生精小管一侧为管壁上皮,另一侧为生发区。各个生精小管中生殖细胞发育不同步:同一个生精小管内生殖细胞成熟方式由近基膜处产生生殖细胞,向管腔推进,最终进入输精小管;不同生精小管生殖细胞由精巢前端顶部开始成熟,沿精巢外侧向后端输精小管方向推移,最终成熟的精子进入输精小管;取不同发育时期的河蟹,依据河蟹外部形态和精巢形态,组织结构及生精小管内占优势的雄性生殖细胞种类和数量,可以把河蟹精巢发育分为5个时期,即精原细胞期,精母细胞期,精子细胞期,精子期和休止期。并初步分析了河蟹性早熟的机制。2.通过苯胺蓝染色和精氨酸坂口sakaguchi氏反应,光镜镜检河蟹精子发生过程表明:从精母细胞→圆形细胞→成熟精子,赖氨酸含量由多到少。精母细胞无特异染色。精子核内无碱性蛋白,顶体中头帽、顶体囊内、外层有赖氨酸分布;坂口sakaguchi氏反结果:无红色沉淀生成,即没有发现精氨酸。对照组以小鼠睾丸为实验材料,苯胺蓝染色后,小鼠睾丸精原细胞呈现深蓝色,精子区域蓝色很浅。坂口sakaguchi氏反应使精子整个头部都生成红色沉淀,而精原细胞显浅红色。……   
[关键词]:中华绒螯蟹;精巢;精子;核碱性蛋白;SDS-PAGE;AU-PAGE;组蛋白
[文献类型]:硕士论文
[文献出处]:河北大学2006年